Sample collection and DNA extractio

Sample collection and DNA extraction
To answer the above questions, we sequenced the mitochon- drial cytochrome b gene from 448 individuals. The study sample
represents 16 adults of L reevesii collected between 2007 and 2008 from each of 28 sampling localities almost covering the spe- cies’ distribution range from Chinese mainland (Guangdong and Guangxi) to Hainan (the largest island second to Taiwan in China) and Vietnam (Fig. 1). During our collecting trip to the coastal re- gion of Vietnam and Guangxi (a province of China), we did not find any L. reevesii in the north of Vietnam and in the west of Guangxi, close to Vietnam. This is the region where the microcontinental blocks of Southeast Asia and the megacontinent of Asia contacted (Fig. 1), currently having no habitat suitable for L. reevesii.
The most distal 15 mm of the tail tip of each lizard was excised using a sterilized scalpel. Individual lizards were released at their site of capture after tissue sampling. Tissue samples were pre- served in 95% ethanol before they were deposited at Hangzhou Normal University and assigned voucher numbers identified by locality-haplotype numbers. Total DNA was extracted using stan- dard phenol–chloroform methods (Sambrook et al., 1989), and stored at

Results (Vietnamese) 1:

Bộ sưu tập mẫu và khai thác DNAĐể trả lời các câu hỏi trên, chúng tôi trình tự mitochon-drial cytochrome b gen từ 448 cá nhân. Nghiên cứu mẫuđại diện cho 16 người lớn của L reevesii thu thập từ năm 2007 đến năm 2008 từ mỗi 28 lấy mẫu địa phương hầu như bao gồm phạm vi phân phối spe-cies' từ Trung Quốc đại lục (Guangdong và Quảng Tây) tới Hainan (đảo lớn thứ hai đến Đài Loan tại Trung Quốc) và Việt Nam (hình 1). Trong chuyến đi thu thập của chúng tôi để re-gion ven biển của Việt Nam và Quảng Tây (một tỉnh của Trung Quốc), chúng tôi đã không thấy bất kỳ L. reevesii ở phía bắc của Việt Nam và ở phía tây của Quảng Tây, gần gũi với Việt Nam. Đây là khu vực nơi các khối microcontinental của đông nam á và megacontinent của Châu á liên lạc (hình 1), hiện nay có môi trường sống không thích hợp cho L. reevesii.15 mm đặt xa đầu đuôi của mỗi con thằn lằn đã excised bằng cách sử dụng một scalpel tiệt trùng. Thằn lằn cá nhân đã được phát hành tại trang web của họ bắt giữ sau khi lấy mẫu mô. Mẫu mô đã được trước khi phục vụ trong 95% ethanol trước khi họ đã được gửi tại hàng Châu Đại học sư phạm và gán số phiếu được xác định bởi số lượng địa phương-haplotype. Tất cả DNA được chiết xuất bằng cách sử dụng phương pháp phenol-cloroform stan Sở NN & PTNT (Sambrook và ctv., 1989), và được lưu trữ ở