We present a method that uses fluor

We present a method that uses fluorescent cellular barcodes to increase the number of unique samples that can be analyzed simultaneously by microengraving, a nanowell array-based technique for quantifying the secretory responses of thousands of single cells in parallel. Using n different fluorescent dyes to generate 2n unique cellular barcodes, we achieved a 2n-fold reduction in the number of arrays and quantity of reagents required per sample. The utility of this approach was demonstrated in three applications of interest in clinical and experimental immunology. Using barcoded human peripheral blood mononuclear cells and T cells, we constructed dose–response curves, profiled the secretory behavior of cells treated with mechanistically distinct stimuli, and tracked the secretory behaviors of different lineages of CD4+ T helper cells. In addition to increasing the number of samples analyzed by generating secretory profiles of single cells from multiple populations in a time- and reagent-efficient manner, we expect that cellular barcoding in combination with microengraving will facilitate unique experimental opportunities for quantitatively analyzing interactions among heterogeneous cells isolated in small groups (2–5 cells).

Results (Thai) 1:

เรานำเสนอวิธีการที่ใช้บาร์โค้ดมือถือเรืองแสงเพื่อเพิ่มจำนวนตัวอย่างเฉพาะที่สามารถวิเคราะห์ได้พร้อมกัน โดย microengraving, nanowell อยู่แถวเทคนิคสำหรับ quantifying ตอบ secretory พันเซลล์เดียวพร้อมกัน เราใช้สีเรืองแสงแตกต่างกัน n การสร้างบาร์โค้ดมือถือเฉพาะ 2n สำเร็จลดพับ 2n จำนวนอาร์เรย์และปริมาณของ reagents ต่อตัวอย่าง โปรแกรมอรรถประโยชน์ของวิธีการนี้ถูกแสดงในโปรแกรมประยุกต์สามน่าสนใจในภูมิคุ้มกันวิทยาคลินิก และทดลอง ใช้ barcoded เลือดมนุษย์ต่อพ่วง mononuclear เซลล์และทีเซลล์ เราสร้างยา – ตอบเส้นโค้ง profiled secretory ลักษณะการทำงานของเซลล์ที่รับสิ่งเร้าที่แตกต่างกัน mechanistically และติดตามพฤติกรรมของเชื้อชาติที่แตกต่างกันของเซลล์ CD4 + T helper secretory นอกจากการเพิ่มจำนวนตัวอย่างวิเคราะห์ โดยการสร้างโพรไฟล์ secretory เซลล์เดียวจากประชากรหลายอย่างเวลา และรีเอเจนต์ประสิทธิภาพ เราคาดว่ามือถือที่ซอฟต์แวร์ร่วมกับ microengraving จะอำนวยความสะดวกโอกาสทดลองเฉพาะ quantitatively วิเคราะห์ระหว่างเซลล์ต่างชนิดที่แยกต่างหากในกลุ่มขนาดเล็ก (2-5 เซลล์)

Results (Thai) 2:

เรานำเสนอวิธีการที่ใช้บาร์โค้ดโทรศัพท์มือถือเรืองแสงที่จะเพิ่มจำนวนของกลุ่มตัวอย่างที่ไม่ซ้ำกันที่สามารถวิเคราะห์ได้พร้อมกันโดย microengraving เทคนิคอาร์เรย์ตาม nanowell สำหรับปริมาณการตอบสนองหลั่งพันของเซลล์เดียวในแบบคู่ขนาน การใช้สีย้อม n เรืองแสงที่แตกต่างกันในการสร้างบาร์โค้ด 2n โทรศัพท์มือถือที่ไม่ซ้ำกันเราประสบความสำเร็จในการลด 2n เท่าในจำนวนของอาร์เรย์และปริมาณของสารที่จำเป็นต่อตัวอย่าง ยูทิลิตี้ของวิธีนี้ก็แสดงให้เห็นในสามโปรแกรมที่น่าสนใจในภูมิคุ้มกันทางคลินิกและการทดลอง ใช้ barcoded มนุษย์เซลล์โมโนนิวเคลียร์ในเลือดและเซลล์ T เราสร้างเส้นโค้งปริมาณการตอบสนอง, ประวัติพฤติกรรมหลั่งของเซลล์รับการรักษาด้วยการกระตุ้นที่แตกต่างกัน mechanistically และการติดตามพฤติกรรมการหลั่งของ lineages ที่แตกต่างกันของ CD4 + T เซลล์ผู้ช่วย นอกจากการเพิ่มจำนวนตัวอย่างการวิเคราะห์โดยการสร้างโปรไฟล์หลั่งของเซลล์เดียวจากประชากรในหลายลักษณะที่เวลาและสารที่มีประสิทธิภาพที่เราคาดหวังว่าบาร์โค้ดมือถือในการรวมกันกับ microengraving โอกาสจะอำนวยความสะดวกการทดลองไม่ซ้ำกันสำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณการโต้ตอบกันของเซลล์ที่แตกต่างกัน แยกในกลุ่มเล็ก ๆ (2-5 เซลล์)

Results (Thai) 3:

เราเสนอวิธีการที่ใช้หลอดมือถือบาร์โค้ดเพื่อเพิ่มจำนวนกลุ่มตัวอย่างที่เป็นเอกลักษณ์ที่สามารถวิเคราะห์ได้พร้อมกัน โดย microengraving , nanowell เรย์ตามเทคนิคสำหรับปริมาณการหลั่งของพันเซลล์เดียวในแบบคู่ขนาน ใช้ N เรืองแสงสีเพื่อสร้างเอกลักษณ์แตกต่างกัน 2n ของเซลล์ , บาร์โค้ดเราได้ 2 พับ ลดจำนวนและปริมาณของสารเคมีที่จำเป็นต่อรูปแบบตัวอย่าง ประโยชน์ของวิธีการนี้พบว่าใน 3 โปรแกรมที่น่าสนใจในและภูมิคุ้มกันวิทยาคลินิกทดลอง บรรณานุกรมของมนุษย์ปกติใช้เม็ดเลือดขาวเซลล์และเซลล์ T เราสร้างการ dose ) เส้นโค้งวิเคราะห์พฤติกรรมของการพบเซลล์ mechanistically แตกต่างกันสิ่งเร้า และติดตามพฤติกรรมของพันธุ์ที่แตกต่างกันพบ CD4 ทีเฮลเปอร์เซลล์ นอกจากการเพิ่มจำนวนกลุ่มตัวอย่างที่ได้มาโดยการสร้าง secretory โปรไฟล์ของเซลเดี่ยว จากประชากรหลายในเวลาและลักษณะที่มีประสิทธิภาพรีเอเจนต์เราคาดหวังว่า มือถือ barcoding ร่วมกับ microengraving จะช่วยโอกาสทดลองเฉพาะปริมาณวิเคราะห์ปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์ที่แยกได้ในกลุ่มบริษัทขนาดเล็ก ( 2 – 5 เซลล์ )