ObjectiveTo evaluate lipidomic diff

Objective
To evaluate lipidomic differences between breast- and formula-fed infants.

Study design
We utilized high-resolution mass-spectrometry methods to analyze 3.2 mm dried blood spot samples collected at ages 3 months (n = 241) and 12 months (n = 144) from a representative birth cohort study. Lipidomic profiles were compared between infants exclusively breast-fed, formula-fed, or mixed-fed, and related to 12-month infancy weight. Data analysis included supervised multivariate statistics (partial least squares discriminant analysis), and univariate analysis with correction for multiple testing.

Results
Distinct differences in 3-month lipidomic profiles were observed between exclusively breast-fed and formula-fed infants; mixed-fed infants showed intermediate profiles. Principle lipidomic characteristics of breast-fed infants were lower total phosphatidylcholines (PCs), with specifically lower short chain unsaturated PC but higher long chain polyunsaturated PC; higher cholesterol esters; and variable differences in sphingomyelins. At 12 months, lipidomic profiles were markedly different to those at 3 months, and differences between the earlier breast/formula/mixed-feeding groups were no longer evident. However, several specific lipid species, associated with breast-feeding at 3 months, also correlated with differences in 3- to 12-month weight.

Conclusions
State-of-the-art dried blood spot sample lipidomic profiling demonstrated striking differences between breast-fed and formula-fed infants. Although these changes diminished with age, breast-fed lipidomic profiles at 3 months were associated with infancy weight and could potentially represent biomarkers of infant nutrition.

Abbreviations
CBGS, Cambridge Baby Growth StudyCE, Cholesterol esterDBS, Dried blood spotLC-PUFA, Long chain polyunsaturated fatty acidPC, PhosphatidylcholinePC-O, 1-alkyl,2-acylglycerophosphocholinePC-P, 1-(alkenyl),2-acylglycerophosphocholinPLS-DA, Partial least squares-discriminant analysisSM, SphingomyelinTG, Triglyceride
Links between early life exposures and later health outcomes may in part be due to nutritional programming in infancy. This hypothesis is supported by observed long-term benefits associated with breast-feeding, such as better cognitive development in childhood, and lower risks of obesity and high blood pressure in later life.1 Effects of early nutritional interventions in infancy, using nutrient-enriched milk formulas, include increased later risk of metabolic disease.2 However, the underlying mechanisms are unknown and are difficult to study.

Previous work has shown that the biochemical phenotype of infants differs according to feeding practice (breast- vs formula-feeding). Higher total cholesterol levels,3, 4, 5, 6 and 7 higher low density lipoproteins,5 and lower high density lipoproteins7 have been reported in breast-fed infants, and may lead to lower cholesterol levels in adulthood.5, 8 and 9 However, more detailed lipidomic profiling in breast- vs formula-fed infants has not yet been performed. We, therefore, utilized technological developments in lipidomics for metabolic phenotyping10 to obtain a detailed lipidomic profile from dried blood spot (DBS) samples in infants recruited into the Cambridge Baby Growth Study (CBGS). Our aim was to investigate the relationships between infancy feeding and age on specific lipids across multiple lipid classes.

Methods
The CBGS is a prospective observational birth cohort, focusing on the antenatal and early postnatal determinants of infancy growth. Mothers were recruited during early pregnancy from a single antenatal center in Cambridge between 2001 and 2009.11 Their infants were seen at birth by trained research nurses and then followed-up at 3 and 12 months of age, with weight measurements. DBS samples were collected when parents consented, using capillary heel prick sampling, dropping blood spots onto untreated filter paper cards (Ahlstrom 226; ID Biological Systems, Greenville, South Carolina). Infancy feeding (exclusive breast-, mixed-, or exclusive formula-feeding) was assessed by questionnaire at age 3 months. All children were on a full mixed diet by 12 months of age. The study was approved by the Cambridge local research ethics committee, and all mothers gave informed written consent.

DBS samples on filter paper cards were air dried at ambient temperature overnight, before being stored in zip-loc storage bags at −20°C until analysis, when a single 3.2 mm spot was punched from the larger DBS samples. Individuals with sufficient DBS samples for multiple analyses were selected for this nested study.

We recently reported that large-scale lipidomic profiling platforms established for use on plasma samples10 can be successfully adapted to DBS samples.12 In brief, a 3.2 mm DBS was extracted in methanol in a well of a glass-coated 2.4 mL deep well plate (Plate+TM; Esslab, Hadleigh, United Kingdom), and lipids were partitioned into methyl tertiary butyl ether. After centrifugation, the organic layer was concentrated and used for lipid analysis. Samples were infused into a Thermo Exactive benchtop orbitrap (Hemel; Hampstead, United Kingdom), using an Advion Triversa Nanomate (Ithaca, New York) and data acquired in both positive (1.2 kV voltage) and negative modes (−1.5 kV). All experiments were run with blank controls and 2 different quality control samples. In total, 94 lipid species could be detected using this method.

Statistical Analyses
Lipidomic profiles were compared between infants exclusively breast-fed, mixed-fed, and formula-fed, between age 3 vs 12 months, and also related to infancy weight at age 12 months. The obtained lipid signals were semiquantitative, with the signal intensity of each lipid expressed relative to the total lipid signal intensity, for each individual, per thousand (‰). Raw high-resolution mass-spectrometry data were processed using XCMS (www.bioconductor.org) and Peakpicker v 2.0 (an in-house R script). All lipid species where >30% of cases had a value of zero were excluded from further analyses; consequently, 78 lipids were analyzed at 3 months, and 90 lipids were compared between 3- and 12-month samples. Multivariate analysis allowed analysis of multiple variables (all lipid species) together, to avoid loss of information and to identify underlying trends. These data were analyzed in SIMCA-P (v. 13; Umetrics AB, Umeå, Sweden). Data were normalized using log transformation and unit variance scaled. Principal component analysis was used first to observe overall patterns and detect outliers. Partial least squares-discriminant analysis (PLS-DA) plots were then constructed, using Q2 values for cross validation. The PLS-DA algorithm was chosen as this maximizes separation between lipid variables for each categorical outcome (infancy feeding/age), enabling clear determination of variables contributing to any separation. Receiver operating characteristic curves were plotted to assess the predictive ability of obtained models (http://www.roccet.ca/).13 Univariate analysis, using Mann-Whitney U for exclusively breast-fed vs formula-fed infants, and Wilcoxon signed ranks tests for matched age 3 vs 12 month samples, was performed in SPSS v 19 (SPSS Inc, Chicago, Illinois). A stringent Bonferroni corrected P value (

Results (Thai) 1:

วัตถุประสงค์ประเมิน lipidomic ความแตกต่างระหว่างทารกเลี้ยงเต้านม และสูตรศึกษาออกแบบเราใช้วิธีการละเอียดมวล spectrometry เพื่อวิเคราะห์เลือดแห้ง mm 3.2 เก็บรวบรวมตัวอย่างจุดที่อายุ 3 เดือน (n = 241) และ 12 เดือน (n = 144) จากการศึกษา cohort พนักงานเกิด โปรไฟล์ของ Lipidomic ได้เปรียบเทียบระหว่างทารกโดยเฉพาะ breast-fed สูตร อาหาร หรือผสมเลี้ยง และที่เกี่ยวข้องกับตราสินค้า 12 เดือนน้ำหนัก วิเคราะห์ข้อมูลรวมมีสถิติตัวแปรพหุ (การวิเคราะห์ discriminant กำลังสองน้อยที่สุดบางส่วน), และ มีการแก้ไขหลายทดสอบการวิเคราะห์อย่างไร univariateผลลัพธ์ความแตกต่างทั้งหมดในโพรไฟล์ lipidomic 3 เดือนได้สังเกตระหว่างเฉพาะ breast-fed และสูตรเลี้ยงทารก ผสมเลี้ยงทารกพบส่วนกำหนดค่ากลาง หลัก lipidomic ลักษณะของทารก breast-fed ถูกล่างรวม phosphatidylcholines (PCs) มีเฉพาะล่างสั้นโซ่ PC ในระดับที่สมแต่สูงยาวโซ่ไขมัน PC สูงไขมัน esters และความแตกต่างของตัวแปร sphingomyelins ในเดือน 12, lipidomic โพรไฟล์ได้อย่างเด่นชัดแตกต่างกับใน 3 เดือน และความแตกต่างระหว่างเต้านม/สูตร/ผสมอาหารกลุ่มก่อนหน้าได้ไม่ชัด อย่างไรก็ตาม พันธุ์เฉพาะไขมันหลาย เกี่ยวข้องกับช่วงที่ 3 เดือน ยัง correlated มีความแตกต่างใน 3-12 เดือนถึงน้ำหนักบทสรุปสมัยของแห้งเลือดตัวอย่างจุด lipidomic สร้างโพรไฟล์ความแตกต่างโดดเด่นสาธิตระหว่าง breast-fed และสูตรเลี้ยงทารก แม้ว่าการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ลดลงอายุ breast-fed lipidomic โพรไฟล์ใน 3 เดือนสัมพันธ์กับน้ำหนักตราสินค้า และอาจแสดงถึง biomarkers ของทารกโภชนาการคำย่อCBGS เคมบริดจ์ทารกเจริญเติบโต StudyCE, esterDBS ไขมัน แห้งเลือด spotLC-PUFA, acidPC ไขมันไม่อิ่มตัวสายยาว โอ PhosphatidylcholinePC, 1 alkyl, 2-acylglycerophosphocholinePC-P, 1- (alkenyl) 2-acylglycerophosphocholinPLS-DA บางส่วนกำลังสองน้อยสุด-discriminant analysisSM, SphingomyelinTG ไตรกลีเซอไรด์เชื่อมโยงระหว่างช่วงชีวิตภาพและผลลัพธ์สุขภาพภายหลังบางส่วนได้เนื่องจากโปรแกรมโภชนาการในวัยเด็ก สมมติฐานนี้ได้รับการสนับสนุนโดยสังเกตประโยชน์ระยะยาวที่สัมพันธ์กับช่วง เช่นดีพัฒนารับรู้ในวัยเด็ก และความเสี่ยงต่ำของโรคอ้วนและความดันโลหิตสูงใน life.1 ต่อผลของงานวิจัยทางโภชนาการช่วงในวัยเด็ก โดยใช้สูตรน้ำนมอุดมไปสาร รวมหลังเสี่ยงเผาผลาญ disease.2 อย่างไรก็ตาม กลไกต้นแบบจะไม่รู้จัก และยากต่อการศึกษางานก่อนหน้านี้ได้แสดงว่า phenotype ชีวเคมีของทารกแตกต่างตามอาหารฝึกหัด (เต้านมเทียบกับสูตรอาหาร) ระดับไขมันสูงรวม 3, 4, 5, 6 และ 7 สูงความหนาแน่นต่ำ lipoproteins, 5 และต่ำกว่าความหนาแน่นสูง lipoproteins7 ถูกรายงานในทารก breast-fed และอาจจะลดระดับไขมันใน adulthood.5, 8 และ 9 อย่างไรก็ตาม รายละเอียดเพิ่มเติม lipidomic สร้างโพรไฟล์ในเต้านมเปรียบเทียบกับสูตรอาหารทารกยังตอบ ดังนั้น เรา ใช้พัฒนาเทคโนโลยีใน lipidomics สำหรับเผาผลาญ phenotyping10 เพื่อดูรายละเอียด lipidomic โปรไฟล์จากเลือดแห้ง (เศรษฐกิจ) ตัวอย่างที่จุดในทารกพิจารณาไปเคมบริดจ์เด็กเจริญเติบโตการศึกษา (CBGS) จุดมุ่งหมายของเราคือการ ตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่างตราสินค้าอาหารและอายุในโครงการเฉพาะในไขมันหลายชั้นวิธีการCBGS เป็นผู้ผ่านเกิดสังเกตการณ์อนาคต เน้นครรภ์ และต้น postnatal ดีเทอร์มิแนนต์ของวัยเด็กเติบโตได้ แม่ถูกพิจารณาในระหว่างตั้งครรภ์ช่วงจากเดี่ยวครรภ์ศูนย์ในเคมบริดจ์ระหว่างปีค.ศ. 2001 และ 2009.11 ทารกของพวกเขาได้เห็นที่เกิดจากการอบรมวิจัยพยาบาลแล้ว ติดตามที่ 3 และ 12 เดือนของอายุ มีการวัดน้ำหนัก ตัวอย่างเศรษฐกิจได้เก็บรวบรวมเมื่อผู้ปกครองยินยอม ใช้ส้นเส้นเลือดฝอยพริกเด็ด วางจุดเลือดบนกระดาษกรองไม่ถูกรักษาบัตร (Ahlstrom 226 รหัสระบบชีวภาพ กรี เซาท์แคโรไลนา) ตราสินค้าอาหาร (เฉพาะเต้านม- ผสม หรือเฉพาะสูตรให้อาหาร) เป็นประเมินตามแบบสอบถามที่อายุ 3 เดือน เด็กทุกคนมีในอาหารผสมครบ 12 เดือนของอายุ การศึกษาได้รับการอนุมัติ โดยคณะกรรมการจริยธรรมวิจัยท้องถิ่นเคมบริดจ์ และแม่ทั้งหมดให้ทราบเป็นลายลักษณ์อักษรยินยอมเศรษฐกิจตัวอย่างบนบัตรกระดาษกรองอากาศแห้งที่อุณหภูมิค้างคืน ก่อนที่จะถูกเก็บในถุงซิปล็อคเก็บที่ −20 ° C จนถึงการวิเคราะห์ mm 3.2 เดียวจุดมีเจาะรูจากตัวอย่างเศรษฐกิจขนาดใหญ่ได้ บุคคลที่ มีตัวอย่างเศรษฐกิจเพียงพอสำหรับการวิเคราะห์ต่าง ๆ ถูกเลือกสำหรับการศึกษานี้ซ้อนกันเรารายงานเมื่อเร็ว ๆ นี้ที่ lipidomic ขนาดใหญ่ที่สร้างโพรไฟล์สำหรับใช้กับพลาสม่า samples10 แพลตฟอร์มสามารถเรียบร้อยแล้วปรับให้เศรษฐกิจ samples.12 สังเขป mm 3.2 เศรษฐกิจถูกสกัดในเมทานอลในความดีของการเคลือบแก้ว 2.4 mL ลึกดีจาน (จาน + TM Esslab แฮดเลห์ สหราชอาณาจักร), และโครงการถูกแบ่งออกเป็นอีเทอร์ methyl ด...ระดับตติยภูมิ หลังจาก centrifugation ชั้นอินทรีย์เข้มข้น และใช้สำหรับวิเคราะห์ไขมัน ตัวอย่างที่ลงตัวในการ orbitrap benchtop เทอร์โม Exactive (Hemel แฮมป์สเตด สหราชอาณาจักร), โดยใช้การ Advion Triversa Nanomate (Ithaca, New York) และรับค่าบวก (1.2 kV แรง) และโหมดการลบข้อมูล (−1.5 kV) ทดลองทั้งหมดถูกเรียกใช้กับตัวควบคุมว่างควบคุมคุณภาพแตกต่างกันตัวอย่างที่ 2 รวม 94 ไขมันชนิดพบการใช้วิธีนี้วิเคราะห์ทางสถิติLipidomic profiles were compared between infants exclusively breast-fed, mixed-fed, and formula-fed, between age 3 vs 12 months, and also related to infancy weight at age 12 months. The obtained lipid signals were semiquantitative, with the signal intensity of each lipid expressed relative to the total lipid signal intensity, for each individual, per thousand (‰). Raw high-resolution mass-spectrometry data were processed using XCMS (www.bioconductor.org) and Peakpicker v 2.0 (an in-house R script). All lipid species where >30% of cases had a value of zero were excluded from further analyses; consequently, 78 lipids were analyzed at 3 months, and 90 lipids were compared between 3- and 12-month samples. Multivariate analysis allowed analysis of multiple variables (all lipid species) together, to avoid loss of information and to identify underlying trends. These data were analyzed in SIMCA-P (v. 13; Umetrics AB, Umeå, Sweden). Data were normalized using log transformation and unit variance scaled. Principal component analysis was used first to observe overall patterns and detect outliers. Partial least squares-discriminant analysis (PLS-DA) plots were then constructed, using Q2 values for cross validation. The PLS-DA algorithm was chosen as this maximizes separation between lipid variables for each categorical outcome (infancy feeding/age), enabling clear determination of variables contributing to any separation. Receiver operating characteristic curves were plotted to assess the predictive ability of obtained models (http://www.roccet.ca/).13 Univariate analysis, using Mann-Whitney U for exclusively breast-fed vs formula-fed infants, and Wilcoxon signed ranks tests for matched age 3 vs 12 month samples, was performed in SPSS v 19 (SPSS Inc, Chicago, Illinois). A stringent Bonferroni corrected P value (<.0006) was used to identify significant associations with individual lipids. This was calculated by dividing the significance threshold of .05 by the number of variables, in this case the lipids analyzed (78 at 3 months; 90 comparing 3 and 12 months). Spearman correlations were used for correlations between DBS lipids and infancy weight.ResultsTwo hundred forty-one infants (110 male) had DBS lipidomic profiles measured at age 3 months (mean ± SD: 97 ± 9 days of age); 141 infants (77 male) at 12 months (373 ± 12 days), with 45 paired samples from the same infants at both time points. The cohort characteristics are summarized in Table I, and the sample was representative of the total CBGS (N = 1340 at 3 months), with mean ± SD birth weight 3.49 ± 0.55 kg, at 39.8 ± 1.6 weeks gestation, 3-month weight 6.15 ± 0.83 kg, and 12-month weight 9.97 ± 1.19 kg.

Results (Thai) 2:

วัตถุประสงค์
เพื่อศึกษาความแตกต่างระหว่าง lipidomic ทารกนมบุตรและสูตรอาหาร. รูปแบบการศึกษาเราใช้ความละเอียดสูงวิธีมวลมวลสารในการวิเคราะห์ 3.2 มมแห้งตัวอย่างเลือดที่เก็บรวบรวมจุดที่อายุ 3 เดือน (n = 241) และ 12 เดือน (n = 144 ) จากการศึกษาการศึกษาการเกิดตัวแทน โปรไฟล์ Lipidomic เปรียบเทียบระหว่างเด็กทารกโดยเฉพาะเต้านมที่กินสูตรอาหารหรือผสมอาหารและที่เกี่ยวข้องกับ 12 เดือนน้ำหนักวัยเด็ก . การวิเคราะห์ข้อมูลรวมสถิติหลายตัวแปรภายใต้การดูแล (สี่เหลี่ยมอย่างน้อยบางส่วนวิเคราะห์จำแนก) และการวิเคราะห์ univariate กับการแก้ไขสำหรับการทดสอบหลายผลแตกต่างที่แตกต่างใน 3 เดือนโปรไฟล์ lipidomic ถูกตั้งข้อสังเกตระหว่างที่กินนมแม่โดยเฉพาะและทารกสูตรอาหาร; ทารกผสมเลี้ยงแสดงให้เห็นโปรไฟล์กลาง ลักษณะหลักการ lipidomic ของทารกที่กินนมแม่ลดลง phosphatidylcholines รวม (พีซี) ที่มีห่วงโซ่สั้นที่ลดลงเฉพาะเครื่องคอมพิวเตอร์ แต่ไม่อิ่มตัวสายยาวที่สูงกว่าเครื่องคอมพิวเตอร์ไม่อิ่มตัว; เอสเทอคอเลสเตอรอลสูงกว่า; และความแตกต่างในตัวแปร sphingomyelins 12 เดือนที่โปรไฟล์ lipidomic ได้โดดเด่นแตกต่างให้กับผู้ที่ 3 เดือนและความแตกต่างระหว่างก่อนหน้านี้เต้านม / สูตร / กลุ่มผสมอาหารไม่ได้อยู่เห็นได้ชัด แต่ชนิดของไขมันที่เฉพาะเจาะจงหลายที่เกี่ยวข้องกับนมที่ 3 เดือนนอกจากนี้ยังมีความสัมพันธ์กับความแตกต่างใน 3 น้ำหนัก 12 เดือน. สรุปstate-of-the-Art แห้งตัวอย่างจุดเลือดโปรไฟล์แสดงให้เห็นถึงความแตกต่าง lipidomic ที่โดดเด่นระหว่างที่กินนมแม่ และทารกสูตรอาหาร แม้ว่าการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ลดลงตามอายุที่กินนมแม่โปรไฟล์ lipidomic ที่ 3 เดือนที่มีความสัมพันธ์กับน้ำหนักวัยเด็กและอาจจะเป็นตัวแทนบ่งชี้ทางชีวภาพของสารอาหารทารก. ย่อCBGS เคมบริดจ์เด็กเจริญเติบโต StudyCE, esterDBS คอเลสเตอรอลในเลือดแห้ง spotLC-PUFA โซ่ยาวไขมันไม่อิ่มตัว acidPC, PhosphatidylcholinePC-O, 1 อัลคิล 2 acylglycerophosphocholinePC-P, 1- (alkenyl) 2 acylglycerophosphocholinPLS-DA, บางส่วนน้อย analysisSM สี่เหลี่ยมจำแนก, SphingomyelinTG, Triglyceride การเชื่อมโยงระหว่างความเสี่ยงชีวิตในวัยเด็กและผลลัพธ์ทางสุขภาพต่อมาอาจจะเป็นส่วนหนึ่งใน จะเกิดจากการเขียนโปรแกรมโภชนาการในวัยเด็ก สมมติฐานนี้ได้รับการสนับสนุนโดยผลประโยชน์ระยะยาวสังเกตที่เกี่ยวข้องกับการให้นมเช่นการพัฒนาองค์ความรู้ที่ดีขึ้นในวัยเด็กและความเสี่ยงที่ลดลงของโรคอ้วนและโรคความดันโลหิตสูงในผล life.1 ต่อมาของการแทรกแซงทางโภชนาการต้นในวัยเด็กโดยใช้สารอาหารที่อุดมด้วย สูตรนมรวมถึงความเสี่ยงที่เพิ่มขึ้นของต่อมา disease.2 การเผาผลาญ แต่กลไกไม่เป็นที่รู้จักและเป็นเรื่องยากที่จะศึกษา. การทำงานก่อนหน้าได้แสดงให้เห็นว่าฟีโนไทป์ทางชีวเคมีของทารกที่แตกต่างกันไปตามการปฏิบัติให้อาหาร (นมบุตรเทียบกับสูตรนม) ระดับคอเลสเตอรอลรวมสูง, 3, 4, 5, 6 และ 7 ที่สูงขึ้นความหนาแน่นต่ำ lipoproteins, 5 และลด lipoproteins7 ความหนาแน่นสูงได้รับการรายงานในทารกที่กินนมแม่และอาจนำไปสู่การลดระดับคอเลสเตอรอลใน adulthood.5, 8 และ 9 อย่างไรก็ตาม โปรไฟล์รายละเอียดเพิ่มเติม lipidomic ในนมบุตรเทียบกับทารกสูตรอาหารยังไม่ได้รับการดำเนินการยัง ดังนั้นเราจึงนำมาใช้ในการพัฒนาเทคโนโลยีสำหรับ lipidomics phenotyping10 การเผาผลาญอาหารที่จะได้รับรายละเอียดรายละเอียด lipidomic จากจุดเลือดแห้ง (DBS) ตัวอย่างในทารกได้รับคัดเลือกเข้าศึกษาการเจริญเติบโตของเด็กเคมบริดจ์ (CBGS) จุดมุ่งหมายของเราคือการศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างการให้อาหารทารกและอายุในไขมันเฉพาะชั้นเรียนทั่วไขมันหลาย. วิธีCBGS เป็นที่คาดหวังการศึกษาเกิดการสังเกตโดยมุ่งเน้นที่ปัจจัยหลังคลอดฝากครรภ์และการเริ่มต้นของการเจริญเติบโตของทารก แม่ได้รับคัดเลือกในระหว่างตั้งครรภ์ในช่วงต้นจากศูนย์ฝากครรภ์เดียวในเคมบริดจ์ระหว่างปี 2001 และ 2,009.11 ทารกของพวกเขาถูกมองเห็นได้ที่เกิดจากการวิจัยการฝึกอบรมพยาบาลแล้วตามขึ้นที่ 3 และ 12 เดือนของอายุที่มีการวัดน้ำหนัก ตัวอย่างดีบีเอสที่ถูกเก็บรวบรวมเมื่อพ่อแม่ยินยอมโดยใช้การสุ่มตัวอย่างทิ่มส้นเท้าเส้นเลือดฝอยลดลงจุดเลือดลงบนบัตรกระดาษกรองได้รับการรักษา (Ahlstrom 226; ID ระบบชีวภาพ, กรีน, เซาท์แคโรไลนา) การให้อาหารทารก (นมบุตรพิเศษ mixed- หรือพิเศษสูตรนม) ได้รับการประเมินโดยใช้แบบสอบถามที่อายุ 3 เดือน เด็กทุกคนที่อยู่ในอาหารผสมเต็มรูปแบบโดย 12 เดือนของอายุ การศึกษาได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมการวิจัยในท้องถิ่นเคมบริดจ์และคุณแม่ให้ความยินยอมเป็นลายลักษณ์อักษร. ดีบีเอสตัวอย่างบนบัตรกระดาษกรองถูกอากาศแห้งที่อุณหภูมิห้องในชั่วข้ามคืนก่อนที่จะถูกเก็บไว้ในถุงซิปจัดเก็บ loc ที่ -20 ° C จนการวิเคราะห์ เมื่อเดียว 3.2 มมจุดที่ถูกกดจากกลุ่มตัวอย่างขนาดใหญ่ดีบีเอส บุคคลที่มีตัวอย่างดีบีเอสที่เพียงพอสำหรับการวิเคราะห์หลายถูกเลือกสำหรับการศึกษานี้ซ้อนกัน. เราเพิ่งรายงานว่าขนาดใหญ่แพลตฟอร์มโปรไฟล์ lipidomic ที่จัดตั้งขึ้นเพื่อการใช้งานบน samples10 พลาสม่าสามารถปรับประสบความสำเร็จดีบีเอส samples.12 ในช่วงสั้น ๆ 3.2 มมดีบีเอสถูกสกัดใน เมทานอลในกันดีของแก้วเคลือบ 2.4 มิลลิลิตรจานลึกดี (+ Plate TM; Esslab, Hadleigh, สหราชอาณาจักร) และไขมันที่ถูกแบ่งออกเป็นบิวทิลอีเทอร์เมธิลในระดับอุดมศึกษา หลังจากที่ปั่นชั้นอินทรีย์เข้มข้นและใช้ในการวิเคราะห์ไขมัน ตัวอย่าง infused เป็นเทอร์โม Exactive benchtop orbitrap (Hemel; Hampstead, สหราชอาณาจักร) โดยใช้ Advion Triversa Nanomate (อิธาก้านิวยอร์ก) และข้อมูลที่ได้มาทั้งในเชิงบวก (1.2 กิโลโวลต์แรงดันไฟฟ้า) และโหมดลบ (-1.5 กิโลโวลต์) การทดลองทั้งหมดได้รับการทำงานที่มีการควบคุมที่ว่างเปล่าและ 2 ตัวอย่างการควบคุมคุณภาพที่แตกต่างกัน รวม 94 ชนิดไขมันสามารถตรวจพบการใช้วิธีนี้. การวิเคราะห์ทางสถิติโปรไฟล์ Lipidomic เปรียบเทียบระหว่างเด็กทารกโดยเฉพาะเต้านมที่กินผสมอาหารและสูตรอาหาร, อายุระหว่าง 3 เทียบกับ 12 เดือนและยังเกี่ยวข้องกับวัยเด็กที่อายุน้ำหนัก 12 เดือน ได้รับสัญญาณเป็นแบบกึ่งปริมาณไขมันที่มีความเข้มของสัญญาณไขมันแต่ละแสดงความสัมพันธ์กับความเข้มของสัญญาณไขมันรวมสำหรับแต่ละบุคคลต่อพัน (‰) วัตถุดิบมีความละเอียดสูงข้อมูลมวลมวลสารที่ถูกประมวลผลโดยใช้ XCMS (www.bioconductor.org) และ Peakpicker โวลต์ 2.0 (R สคริปต์ในบ้าน) ทุกชนิดของไขมันที่> 30% ของกรณีมีค่าเป็นศูนย์ได้รับการยกเว้นจากการวิเคราะห์การต่อไป ดังนั้น 78 ไขมันวิเคราะห์ที่ 3 เดือนและ 90 ไขมันเปรียบเทียบระหว่าง 3 และตัวอย่าง 12 เดือน การวิเคราะห์หลายตัวแปรการวิเคราะห์ที่ได้รับอนุญาตของตัวแปรหลาย ๆ (ทุกชนิดไขมัน) เข้าด้วยกันเพื่อหลีกเลี่ยงการสูญเสียข้อมูลและเพื่อระบุแนวโน้มพื้นฐาน ข้อมูลเหล่านี้ถูกนำมาวิเคราะห์ใน SIMCA-P (V 13. Umetrics AB, Umeå, สวีเดน) ข้อมูลปกติโดยใช้บันทึกการเปลี่ยนแปลงและแปรปรวนหน่วยปรับ การวิเคราะห์องค์ประกอบหลักเป็นครั้งแรกที่จะสังเกตเห็นรูปแบบโดยรวมและตรวจสอบค่าผิดปกติ การวิเคราะห์จำแนกสี่เหลี่ยมอย่างน้อยบางส่วน (PLS-DA) แปลงที่ถูกสร้างขึ้นแล้วโดยใช้ค่าไตรมาสที่ 2 สำหรับการตรวจสอบข้าม ขั้นตอนวิธี PLS-DA ได้รับเลือกเช่นนี้ช่วยเพิ่มการแยกระหว่างตัวแปรไขมันสำหรับแต่ละผลเด็ดขาด (วัยเด็กการให้อาหาร / อายุ) ที่ช่วยให้การตัดสินใจที่ชัดเจนของตัวแปรที่เอื้อต่อการแยกใด ๆ รับการดำเนินงานลักษณะโค้งถูกพล็อตในการประเมินความสามารถในการคาดการณ์ของรูปแบบที่ได้รับ (http://www.roccet.ca/).13 การวิเคราะห์แบบ univariate ใช้ U-แมนน์วิทนีย์สำหรับเฉพาะที่เลี้ยงด้วยนมแม่เทียบกับทารกสูตรอาหารและ Wilcoxon ลงนาม อันดับการทดสอบอายุการจับคู่ 3 เทียบกับกลุ่มตัวอย่าง 12 เดือนได้รับการดำเนินการใน SPSS 19 โวลต์ (SPSS Inc ชิคาโกอิลลินอยส์) เข้มงวด Bonferroni แก้ไขค่า P (<0.0006) ถูกนำมาใช้ในการระบุความสัมพันธ์ที่สำคัญกับไขมันของแต่ละบุคคล นี้ได้รับการคำนวณโดยการหารเกณฑ์สำคัญของ 05 จากจำนวนของตัวแปรในกรณีนี้ไขมันวิเคราะห์ (78 เวลา 3 เดือน 90 เปรียบเทียบ 3 และ 12 เดือน) ความสัมพันธ์สเปียร์แมนถูกนำมาใช้สำหรับความสัมพันธ์ระหว่างไขมันดีบีเอสและน้ำหนักวัยเด็ก. ผลสองร้อยสี่สิบเอ็ดทารก (110 ชาย) ดีบีเอสมีโปรไฟล์ lipidomic วัดที่อายุ 3 เดือน (ค่าเฉลี่ย± SD: 97 ± 9 วันของอายุ); ทารก 141 (77 ชาย) เวลา 12 เดือน (373 ± 12 วัน) โดยมีกลุ่มตัวอย่าง 45 คู่จากทารกเดียวกันในทั้งสองจุดเวลา ลักษณะการศึกษาได้สรุปไว้ในตารางที่ผมและกลุ่มตัวอย่างเป็นตัวแทนของทั้งหมด CBGS (ยังไม่มี = 1340 3 เดือน) มีค่าเฉลี่ย± SD เกิดน้ำหนัก 3.49 ± 0.55 กก. ที่ 39.8 ± 1.6 สัปดาห์การตั้งครรภ์น้ำหนัก 3 เดือน 6.15 ± 0.83 กิโลกรัมและน้ำหนัก 12 เดือน 9.97 ± 1.19 กิโลกรัม

Results (Thai) 3:

วัตถุประสงค์เพื่อศึกษาความแตกต่างระหว่าง
lipidomic นมและสูตรอาหารทารก


เราใช้ศึกษาการออกแบบความละเอียดสูงมวลสารวิธีการวิเคราะห์ 3.2 มม. จุดเก็บตัวอย่างเลือดแห้งในวัย 3 เดือน ( N = 241 ) และ 12 เดือน ( N = 144 ) จากตัวแทนควันศึกษา โปรไฟล์ lipidomic เปรียบเทียบระหว่างให้นมทารกโดยเฉพาะ สูตรอาหาร หรือผสม การเลี้ยงดูและที่เกี่ยวข้องกับ 12 เดือนน้ำหนักวัยทารก การวิเคราะห์ข้อมูล ได้แก่ สถิติหลายตัวแปร ( มีบางส่วนอย่างน้อย discriminant analysis ) และการวิเคราะห์กลุ่มที่มีการแก้ไขสำหรับการทดสอบหลาย ผล

ความแตกต่างที่แตกต่างกันใน 3 เดือน lipidomic โปรไฟล์ที่พบระหว่างเฉพาะและสูตรอาหารทารกกินนม ผสมอาหารทารกแสดงโปรไฟล์ระดับกลางหลักการ lipidomic ลักษณะของเต้านมเลี้ยงทารกลดลงรวม phosphatidylcholines ( พีซี ) ด้วย โดยเฉพาะลดห่วงโซ่สั้นไม่อิ่มตัวสูงกว่าพีซี แต่โซ่ยาวไม่อิ่มตัวสูงกว่าพีซี ตีนเปล่า และความแตกต่างของตัวแปรใน sphingomyelins . ใน 12 เดือน สภาพ lipidomic เป็นอย่างที่แตกต่างกันใน 3 เดือน