However, pronuclear injection is ve

However, pronuclear injection is very unreliable. This is due to DNA uptake and integration into the genome of the egg cell being a very rare event, typically resulting in 1 to 5 transgenic animals out of every 100 being born. Dolly the sheep, the first animal cloned by pronuclear injection, was the result of one success out of 277 eggs [3]. Another Biotech company, PPL Therapeutics, took several years just to produce a flock of 600 transgenic sheep.

It was obvious that if pronuclear injection were the only animal cloning technique available, pharming would not be a feasible option. This problem has been solved by a new technique called ‘nuclear transfer’, which solves the low percentage of transgenic offspring by selecting for eggs that have cloned genes integrated into the egg’s genome before it is implanted into the surrogate [4] (see Figure 2) Essentially, cells are transfected as before, with the addition of a gene that makes the egg resistant to an antibiotic if it is expressed properly. This allows for the selection of only those cells that properly express the antibiotic resistance gene, and in conjunction, the gene of interest. The nucleus of these cells are then removed and transferred to an egg that has had its nucleus removed, followed by treating and culturing the egg to allow fusion with the nucleus. Since all the eggs contain the transgene, virtually 100% of the offspring will be transgenic animals.

Results (Thai) 2:

อย่างไรก็ตามการฉีด pronuclear จะไม่น่าเชื่อถือมาก นี้เกิดจากการดูดซึม DNA และบูรณาการในจีโนมของเซลล์ไข่ที่เป็นเหตุการณ์ที่หายากมากมักจะส่งผลให้ใน 1-5 พันธุ์สัตว์ออกจากทุก ๆ 100 ที่กำลังเกิดขึ้น ดอลลี่แกะสัตว์โคลนครั้งแรกโดยการฉีด pronuclear เป็นผลมาจากความสำเร็จอย่างใดอย่างหนึ่งออกมาจากไข่ 277 [3] อีก บริษัท ไบโอเทค, PPL บำบัดใช้เวลาหลายปีในการผลิตเพียงฝูงแกะพันธุ์ 600. มันก็เห็นได้ชัดว่าถ้าฉีด pronuclear เป็นเทคนิคการโคลนสัตว์ใช้ได้เฉพาะ, ฟาร์มมิ่งจะไม่เป็นตัวเลือกที่เป็นไปได้ ปัญหานี้ได้รับการแก้ไขโดยเทคนิคใหม่ที่เรียกว่า 'การถ่ายโอนนิวเคลียร์' ซึ่งจะช่วยแก้เปอร์เซ็นต์ต่ำของลูกหลานพันธุ์โดยการเลือกไข่ที่มีการโคลนยีนที่รวมอยู่ในจีโนมของไข่ก่อนที่จะใส่เข้าไปในตัวแทน [4] (ดูรูปที่ 2 ) เป็นหลักเซลล์ transfected เป็นก่อนที่จะมีการเพิ่มของยีนที่ทำให้ไข่ทนต่อยาปฏิชีวนะหากมีการแสดงออกอย่างถูกต้อง นี้จะช่วยให้การเลือกเฉพาะเซลล์เหล่านั้นที่ถูกต้องแสดงยีนต้านทานยาปฏิชีวนะและร่วมยีนที่น่าสนใจ นิวเคลียสของเซลล์เหล่านี้จะถูกลบออกแล้วและย้ายไปไข่ที่ได้มีนิวเคลียสออกตามด้วยการรักษาและการเพาะเลี้ยงไข่เพื่อให้ฟิวชั่นกับนิวเคลียส ตั้งแต่ไข่ทั้งหมดที่มียีนแทบ 100% ของลูกหลานจะเป็นสัตว์พันธุ์

Results (Thai) 3:

อย่างไรก็ตาม การฉีดโปรนิวเคลียร์เป็นเรื่องที่ไม่น่าเชื่อถือ นี้เป็นเพราะการใช้ดีเอ็นเอและบูรณาการเข้าไปในจีโนมของเซลล์ไข่เป็นเหตุการณ์ที่หายาก มักจะเป็นผลใน 5 พันธุ์สัตว์จากทุก 100 ถูกเกิด ตุ๊กตาแกะ สัตว์ตัวแรกโดยการฉีดโปรนิวเคลียร์ คือ ผลของความสำเร็จของพวกไข่ [ 3 ] อีก บริษัท ไบโอเทค ppl ) , ,ใช้เวลาหลายปีเพื่อผลิตฝูง 600 พันธุ์แกะ

มันชัดเจนว่าถ้าฉีดโปรนิวเคลียร์เป็นเพียงสัตว์โคลนนิ่ง เทคนิคใช้ได้ ฟาร์มมิ่งจะไม่เป็นตัวเลือกที่เป็นไปได้ ปัญหานี้ได้รับการแก้ไขแล้ว โดยเทคนิคใหม่ที่เรียกว่า ' นิวเคลียร์โอน "ซึ่งแก้ค่าต่ำของลูกหลานพันธุ์โดยการเลือกไข่ที่มีการโคลนยีนบูรณาการเข้าไปในไข่ของโครโมโซมก่อนที่มันจะฝังเข้าไปในตัวแทน [ 4 ] ( ดูรูปที่ 2 ) โดยเซลล์จะ transfected เช่นเดิม ด้วยการเพิ่มของยีนที่ทำให้ไข่ที่ทนต่อยาปฏิชีวนะถ้ามันแสดงได้อย่างถูกต้อง .นี้จะช่วยให้สำหรับการเลือกเฉพาะเซลล์ที่ถูกต้องแสดงยีนต้านทานยาปฏิชีวนะ และร่วม , ยีนที่น่าสนใจ นิวเคลียสของเซลล์เหล่านี้จะถูกเอาออกจากนั้น และย้ายไปเป็นไข่ที่มีนิวเคลียสออก ตามด้วยการรักษา และ การเพาะไข่ให้ผสมกับนิวเคลียส ตั้งแต่ไข่ทั้งหมดประกอบด้วยยีน ,เกือบ 100% ของลูกหลานจะเป็นสัตว์ดัดแปลงพันธุกรรม .