A new biosensing flow injection met

A new biosensing flow injection method for the determination of
-amylase activity has been introduced. The method is based on the
analysis of maltose produced during the hydrolysis of starch in the presence of
-amylase. Maltose determination in the flow system was
allowed by the application of peroxide electrode equipped with an enzyme membrane. The membrane was obtained by immobilisation of
glucose oxidase,
-glucosidase and optionally mutarotase on a cellophane, co-crosslinked by gelatin-glutaraldehyde together with bovine
serum albumine.
-Glucosidase hydrolyses maltose to
-d-glucose, which is converted to -d-glucose by mutarotase. -d-Glucose is then
determined via glucose oxidase. The new biosensor has the limit of detection of 50 nmol l−1 maltose, which means 2 nkat ml−1 in
-amylase
activity units, when the reaction time of amylase was 5 min (determined with respect to a signal-to-noise ratio 3:1). When the reaction time
of
-amylase was 30 min, the limit of detection was 0.5 nkat ml−1. A linear range of current response was 0.1–3 mmol l−1 maltose, with a
response time of 35 s. The biosensor was stable at least two months and retained 70% of its original activity (with mutarotase the stability
is decreased to 3 weeks). When the enzyme membrane was stored in a dry state at 4 ◦C in a refrigerator, the lifetime was approximately 6
months (with mutarotase only 3 months).
© 2004 Elsevier B.V. All rights reserved.

Results (Thai) 1:

วิธีการฉีดกระแส biosensing ใหม่สำหรับการกำหนด - amylase กิจกรรมมีการแนะนำ วิธีการตามวิเคราะห์ maltose ผลิตในระหว่างการย่อยแป้งใน - amylase ถูกกำหนด maltose ในระบบไหลเวียนโดยการใช้อิเล็กโทรดเปอร์ออกไซด์ที่มีเมมเบรนมีเอนไซม์ได้ เยื่อได้รับ โดย immobilisation ของoxidase กลูโคส, - glucosidase และเลือก mutarotase บนวุ้น co กระแทก โดย glutaraldehyde ตุ๋นร่วมกับวัวalbumine ซีรั่ม -Glucosidase ใช้ maltose ไป -d กลูโคส ซึ่งจะถูกแปลงเป็น d-กลูโคส โดย mutarotase d-กลูโคสอยู่แล้วกำหนดผ่านกลูโคส oxidase Biosensor ใหม่มีขีดจำกัดของการตรวจจับ 50 นาโนโมล l−1 maltose ซึ่งหมายความว่า 2 nkat ml−1 ใน - amylaseกิจกรรมหน่วย เมื่อเวลาตอบสนองของ amylase 5 นาที (กำหนดตามอัตราส่วนสัญญาณต่อเสียงรบกวน 3:1) เมื่อเวลาปฏิกิริยา-amylase ได้ 30 นาที ขีดจำกัดของการตรวจสอบถูก 0.5 nkat ml−1 ช่วงเชิงเส้นของการตอบสนองปัจจุบันคือ 0.1-3 mmol l−1 maltose มีการเวลา 35 วินาที Biosensor การมีอย่างน้อย 2 เดือน และเก็บ 70% ของกิจกรรมของเดิม (กับ mutarotase ความมั่นคงลดลงเป็นสัปดาห์ที่ 3) เมื่อเยื่อเอนไซม์ถูกเก็บไว้ในสถานะที่ ◦C 4 ในตู้แห้ง อายุการใช้งานได้ประมาณ 6เดือน (mutarotase เพียง 3 เดือน)© 2004 Elsevier b.v สงวนลิขสิทธิ์

Results (Thai) 2:

วิธีการฉีดไหล biosensing ใหม่สำหรับการกำหนด? -amylase กิจกรรมที่ได้รับการแนะนำให้รู้จัก วิธีการที่จะขึ้นอยู่กับ
การวิเคราะห์ของมอลโตสที่ผลิตในระหว่างการย่อยสลายของแป้งในการปรากฏตัวของ? -amylase ความมุ่งมั่นของมอลโตสในระบบการไหลเวียนของถูก
ได้รับอนุญาตโดยการประยุกต์ใช้ขั้วไฟฟ้าเปอร์ออกไซด์พร้อมกับเมมเบรนเอนไซม์ เมมเบรนได้มาจากการตรึงของ
oxidase กลูโคส? -glucosidase และ mutarotase เลือกบนกระดาษแก้วร่วมเชื่อมขวางจากเจลาติน glutaraldehyde ร่วมกับวัว
albumine ซีรั่ม ? -Glucosidase hydrolyses มอลโตสไป? -d กลูโคสซึ่งจะถูกแปลงเป็น -d กลูโคสโดย mutarotase -d กลูโคสก็จะ
กำหนดโดยผ่าน oxidase กลูโคส ไบโอเซนเซอร์ใหม่มีขีด จำกัด ของการตรวจสอบ 50 nmol L-1 มอลโตสซึ่งหมายความว่า 2 nkat ML-1 มีอะไรบ้าง? -amylase
หน่วยกิจกรรมเมื่อเวลาปฏิกิริยาของอะไมเลส 5 นาที (กำหนดด้วยความเคารพต่อเสียงสัญญาณต่อ อัตราส่วน 3: 1) เมื่อเวลาปฏิกิริยา
ของ? -amylase เป็น 30 นาทีขีด จำกัด ของการตรวจสอบ 0.5 nkat ML-1 ช่วงเชิงเส้นของการตอบสนองในปัจจุบันเป็น 0.1-3 มิลลิโมล L-1 มอลโตสที่มี
เวลาตอบสนองของ 35 S ไบโอเซนเซอร์มีเสถียรภาพอย่างน้อยสองเดือนและเก็บไว้ 70% ของกิจกรรมเดิม (กับ mutarotase ความมั่นคง
จะลดลงถึง 3 สัปดาห์) เมื่อเมมเบรนเอนไซม์ที่ถูกเก็บไว้ในสภาพที่แห้งที่อุณหภูมิ 4 ◦Cในตู้เย็นอายุการใช้งานประมาณ 6
เดือน (มี mutarotase เพียง 3 เดือน).
© 2004 Elsevier BV สงวนลิขสิทธิ์