Culture conditions[edit]In general,

Culture conditions[edit]
In general, any glucose-containing medium is suitable for the culture and counting of yeasts, e.g. Sabouraud medium, malt extract agar (MEA), tryptone glucose yeast extract agar (TGY), yeast glucose chloramphenicol agar (YGC).[13] For the detection of acid-resistant yeasts like Z. bailii, acidified media are recommended, such as MEA or TGY with 0.5% (v/v) acetic acid added.[10][14] Plating with agar media is often used for counting of yeasts, with surface spreading technique is preferable to pour plate method because the former technique gives a better recovery of cells with lower dilution errors.[15] The common incubation conditions are aerobic atmosphere, temperature 25 °C for a period of 5 days. Nevertheless, a higher incubation temperature (30 °C) and shorter incubation time (3 days) can be applied for Z. bailii, as the yeast grows faster at this elevated temperature.[14]

Physiological properties[edit]
Among the Zygosaccharomyces spoilage species, Z. bailii possesses the most pronounced and diversified resistance characteristics, enabling it to survive and proliferate in very stressful conditions. It appears that Z. bailii prefers ecological environments characterized by high osmotic conditions. The most frequently described natural habitats are dried or fermented fruits, tree exudates (in vineyards and orchards), and at various stages of sugar refining and syrup production.[4] Besides, it is seldom to encounter Z. bailii as a major spoilage agent in unprocessed foods; usually the yeast only attains importance in processed products when the competition with bacteria and moulds is reduced by intrinsic factors such as pH, water activity (aw), preservatives, etc.[16]

Resistance characteristics[edit]
An outstanding feature of Z. bailii is its exceptional resistance to weak acid preservatives commonly used in foods and beverages, such as acetic, lactic, propionic, benzoic, sorbic acids and sulfur dioxide. In addition, it is reported that the yeast is able to tolerate high ethanol concentrations (≥ 15% (v/v)). The ranges of pH and aw for growth are wide, 2.0 - 7.0 and 0.80 - 0.99, respectively.[4] Besides being preservative resistant, other features that contribute to the spoilage capacity of Z. bailii are: (i) its ability to vigorously ferment hexose sugars (e.g. glucose and fructose), (ii) ability to cause spoilage from an extremely low inoculum (e.g. one viable cell per package of any size), (iii) moderate osmotolerance (in comparison to Zygosaccharomyces rouxii).[3] Therefore, foods at particular risk to spoilage by this yeast usually have low pH (2.5 to 5.0), low aw and contain sufficient amounts of fermentable sugars.[5]

The extreme acid resistance of Z. bailii has been reported by many authors. On several occasions, growth of the yeast has been observed in fruit-based alcohols (pH 2.8 - 3.0, 40 - 45% (w/v) sucrose) preserved with 0.08% (w/v) benzoic acid,[10] and in beverages (pH 3.2) containing either 0.06% (w/v) sorbic acid, 0.07% (w/v) benzoic acid, or 2% (w/v) acetic acid.[17][18] Notably, individual cells in any Z. bailii population differ considerably in their resistance to sorbic acid, with a small fraction able to grow in preservative levels double that of the average population.[19] In some types of food, the yeast is even able to grow in the presence of benzoic and sorbic acids at concentrations higher than those legally permitted and at pH values below the pKa of the acids.[5] For example, according to the European Union (EU) legislation, sorbic acid is limited to 0.03% (w/v) in soft drinks (pH 2.5 - 3.2);[20] however Z. bailii can grow in soft drinks containing 0.05% (w/v) of this acid (pKa 4.8).[21] Particularly, there is strong evidence that the resistance of Z. bailii is stimulated by the presence of multiple preservatives. Hence, the yeast can survive and defeat synergistic preservative combinations that normally provide microbiological stability to processed foods. It has been observed that the cellular acetic acid uptake was inhibited when sorbic or benzoic acid was incorporated into the culture medium. Similarly, ethanol levels up to 10% (v/v) did not adversely influence sorbic and benzoic acid resistance of the yeast at pH 4.0 - 5.0.[4] Moreover, Sousa et al. (1996) [22] have proved that in Z. bailii, ethanol plays a protective role against the negative effect of acetic acid by inhibiting the transport and accumulation of this acid intracellularly.

Like other microorganisms, Z. bailii has the ability to adapt to sub-inhibitory levels of a preservative, which enables the yeast to survive and grow in much higher concentrations of the preservative than before adaptation.[3][10] In addition, it seems that Z. bailii resistance to acetic, benzoic and propionic acid is strongly correlated, as the cells which were adapted to benzoic acid also showed enhanced tolerances to other the preservatives.[23]

Some studies have revealed the negligible effects of different sugars on preservative resistance of Z. bailii, e.g. comparable sorbic and benzoic acid resistance was observed regardless whether the cells were grown in culture medium containing glucose or fructose as fermentable substrates. However, the preservative resistance of the yeast is influenced by glucose level, with maximum resistance obtained at 10 - 20% (w/v) sugar concentrations.[4] As Z. bailii is moderately osmotolerant, the salt and sugar levels in foods are usually insufficient to control its growth.[3][24] The highest tolerance to salt has been observed at low pH values, e.g. the maximum NaCl allowing growth was 12.5% (w/v) at pH 3.0 whereas this was only 5.0% (w/v) at pH 5.0. Moreover, the presence of either salt or sugar has a positive effect on the ability of Z. bailii to initiate growth at extreme pH levels, e.g. the yeast showed no growth at pH 2.0 in the absence of NaCl and sucrose, but grew at this pH in 2.5% (w/v) NaCl or 50% (w/v) sucrose.[25]

Most facultatively fermentative yeast species cannot grow in the complete absence of oxygen. That means limitation of oxygen availability might be useful in controlling food spoilage caused by fermentative yeasts. However, it has been observed that Z. bailii is able to grow rapidly and ferment sugar vigorously in a complex medium under strictly anaerobic condition, indicating that the nutritional requirement for anaerobic growth was met by the complex-medium components. Therefore, restriction of oxygen entry into foods and beverages, which are rich in nutrients, is not a promising strategy to prevent the risk of spoilage by this yeast.[26] Besides, Leyva et al. (1999) [27] have reported that Z. bailii cells can retain their spoilage capability by producing a significant amount of gas even in non-growing conditions (i.e. presence of sugars but absence of nitrogen source).

Preservative resistance mechanisms[edit]
Different strategies have been suggested in accounting for Z. bailii resistance to weak acid preservatives, which include: (i) degradation of the acids, (ii) prevention of entry or removal of acids from the cells, (iii) alteration of the inhibitor target, or amelioration of the caused damage.[3] Particularly, the intrinsic resistance mechanisms of Z. bailii are extremely adaptable and robust. Their functionality and effectiveness are unaffected or marginally suppressed by environmental conditions such as low pH, low aw and limited nutrients.[4]

For a long time, it has been known that Z. bailii can maintain an acid gradient across the cell membrane,[28][29][30] which indicates the induction of a system whereby the cells can reduce the intracellular acid accumulation. According to Warth (1977),[28] Z. bailii uses an inducible, active transport pump to expel acid anions from the cells for counteracting the toxic effects of the acids. As the pump requires energy to function optimally, high sugar levels enhance Z. bailii preservative resistance. Nevertheless, this view was disputed from an observation that the concentration of acid was exactly as predicted from the intracellular, extracellular pH’s and pKa of the acid.[31] Besides, it is unlikely that an active acid extrusion alone would be sufficient to achieve an unequal acid distribution across the cell membrane. Instead, Z. bailii might have developed much more efficient ways of altering its cell membrane to limit the diffusional entry of acids into the cells. This, in turn, will dramatically reduce any need for active extrusion of protons and acid anions, thus saving a lot of energy.[32] Indeed, Warth (1989)[30] has reported that the uptake rate of propionic acid by diffusion in Z. bailii is much lower than in other acid-sensitive yeasts (e.g. Saccharomyces cerevisiae). Hence, it is conceivable that Z. bailii puts more effort on limiting the influx of acids in order to enhance its acid resistance.[32]

Another mechanism of Z. bailii to deal with acid challenge is that the yeast uses a plasma membrane H+-adenosine triphosphatase (H+-ATPase) to expel proton from cells, thereby preventing intracellular acidification.[33] In addition, Cole and Keenan (1987) [31] have suggested that Z. bailii resistance includes an ability to tolerate chronic intracellular pH drops. Besides, the fact that the yeast is able to metabolize preservatives may also contribute to its acid tolerance. Regarding the resistance of Z. bailii to SO2, it has been proposed that the cells reduce the concentration of SO2 by producing extracellular sulphite-binding compounds such as acetaldehyde.[5]

Metabolism[edit]
The fructophilic behaviour is well known in Z. bailii. Unlike most of other yeasts, Z. bailii metabolizes fructose more rapidly than glucose and grows much faster in foods containing ≥ 1% (w/w) of fructose.[4][5] In addition, it has been observed that the alcoholic fermentation under aerobic conditions (the Crabtree effect) in Z. bailii is influenced by the carbon source, i.e. ethanol is produced at a higher rate a

Results (Thai) 1:

สภาพวัฒนธรรม [แก้ไข]ทั่วไป สื่อใด ๆ ที่ประกอบด้วยกลูโคสเหมาะสำหรับวัฒนธรรม และนับ yeasts เช่น Sabouraud กลาง มอลต์สกัด agar (MEA) agar (TGY), ยีสต์น้ำตาลกลูโคส chloramphenicol agar (YGC) สารสกัดจากยีสต์น้ำตาลกลูโคส tryptone [13] สำหรับการตรวจพบ yeasts ทนกรดเช่น bailii z. acidified สื่อแนะนำ เช่นการไฟฟ้านครหลวงหรือ TGY กับกรดน้ำส้ม 0.5% (v/v) เพิ่มขึ้น [10] [14] ชุบกับ agar media มักใช้สำหรับการตรวจนับของ yeasts แพร่กระจายเทคนิคพื้นผิวเป็นกรวดแผ่นวิธีเนื่องจากเทคนิคเดิมให้ฟื้นตัวดีขึ้นของเซลล์ที่มีข้อผิดพลาดเจือจางต่ำกว่า [15] เงื่อนไขบ่มทั่วไปมีบรรยากาศแอโรบิก อุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 5 วัน อย่างไรก็ตาม อุณหภูมิสูงในคณะทันตแพทยศาสตร์ (30 ° C) และเวลาการฟักตัวสั้น (3 วัน) สามารถใช้สำหรับ bailii z. เป็นยีสต์เติบโตรวดเร็วที่อุณหภูมิสูงนี้ [14]คุณสมบัติสรีรวิทยา [แก้ไข]ระหว่างพันธุ์เน่าเสีย Zygosaccharomyces, bailii z.มีการออกเสียงมากที่สุด และหลากหลายลักษณะความต้านทาน ทำให้อยู่รอด และ proliferate ในสภาพที่เครียดมาก ดูเหมือนว่า bailii z.ชอบสภาพแวดล้อมระบบนิเวศโดยเงื่อนไขการออสโมติกสูง อยู่อาศัยธรรมชาติอธิบายบ่อยมีผลไม้แห้ง หรือหมัก ต้นไม้ exudates (ในไร่องุ่นและสวนผลไม้), และขั้นตอนต่าง ๆ ของการผลิตกลั่นและน้ำเชื่อมของน้ำตาล [4] นอกจาก มันจะค่อยพบ bailii z.เป็นตัวแทนใหญ่เน่าเสียในอาหารที่ประมวลผล ปกติยีสต์เฉพาะ attains สำคัญในประมวลผลผลิตภัณฑ์เมื่อแข่งขันกับแบคทีเรียและแม่พิมพ์จะลดลงตามปัจจัย intrinsic เช่น pH น้ำกิจกรรม (สะสม), สารกันบูด ฯลฯ [16]ลักษณะต้านทาน [แก้ไข]An outstanding feature of Z. bailii is its exceptional resistance to weak acid preservatives commonly used in foods and beverages, such as acetic, lactic, propionic, benzoic, sorbic acids and sulfur dioxide. In addition, it is reported that the yeast is able to tolerate high ethanol concentrations (≥ 15% (v/v)). The ranges of pH and aw for growth are wide, 2.0 - 7.0 and 0.80 - 0.99, respectively.[4] Besides being preservative resistant, other features that contribute to the spoilage capacity of Z. bailii are: (i) its ability to vigorously ferment hexose sugars (e.g. glucose and fructose), (ii) ability to cause spoilage from an extremely low inoculum (e.g. one viable cell per package of any size), (iii) moderate osmotolerance (in comparison to Zygosaccharomyces rouxii).[3] Therefore, foods at particular risk to spoilage by this yeast usually have low pH (2.5 to 5.0), low aw and contain sufficient amounts of fermentable sugars.[5]The extreme acid resistance of Z. bailii has been reported by many authors. On several occasions, growth of the yeast has been observed in fruit-based alcohols (pH 2.8 - 3.0, 40 - 45% (w/v) sucrose) preserved with 0.08% (w/v) benzoic acid,[10] and in beverages (pH 3.2) containing either 0.06% (w/v) sorbic acid, 0.07% (w/v) benzoic acid, or 2% (w/v) acetic acid.[17][18] Notably, individual cells in any Z. bailii population differ considerably in their resistance to sorbic acid, with a small fraction able to grow in preservative levels double that of the average population.[19] In some types of food, the yeast is even able to grow in the presence of benzoic and sorbic acids at concentrations higher than those legally permitted and at pH values below the pKa of the acids.[5] For example, according to the European Union (EU) legislation, sorbic acid is limited to 0.03% (w/v) in soft drinks (pH 2.5 - 3.2);[20] however Z. bailii can grow in soft drinks containing 0.05% (w/v) of this acid (pKa 4.8).[21] Particularly, there is strong evidence that the resistance of Z. bailii is stimulated by the presence of multiple preservatives. Hence, the yeast can survive and defeat synergistic preservative combinations that normally provide microbiological stability to processed foods. It has been observed that the cellular acetic acid uptake was inhibited when sorbic or benzoic acid was incorporated into the culture medium. Similarly, ethanol levels up to 10% (v/v) did not adversely influence sorbic and benzoic acid resistance of the yeast at pH 4.0 - 5.0.[4] Moreover, Sousa et al. (1996) [22] have proved that in Z. bailii, ethanol plays a protective role against the negative effect of acetic acid by inhibiting the transport and accumulation of this acid intracellularly.เช่นจุลินทรีย์อื่น ๆ bailii z.มีความสามารถในการปรับใช้ preservative ซึ่งทำให้ยีสต์เพื่อการอยู่รอด และเติบโตในความเข้มข้นสูงมากของ preservative กว่าก่อนปรับ ระดับ sub-inhibitory [3] [10] นอกจากนี้ เหมือนที่ต้านทาน bailii z. benzoic อะซิติก และกรด propionic เป็นอย่างยิ่ง correlated เป็นเซลล์ซึ่งถูกดัดแปลงให้กรด benzoic ยังแสดงให้เห็นการยอมรับเพิ่มขึ้นในสารกันบูด [23]บางการศึกษาได้เปิดเผยผลกระทบระยะของน้ำตาลแตกต่างกันในการต้านทานของ bailii z. preservative เช่น ทนกรด benzoic sorbic และเปรียบเทียบได้ถูกตรวจสอบไม่ว่าเซลล์เติบโตในวัฒนธรรมที่ประกอบด้วยกลูโคสฟรักโทสเป็นพื้นผิว fermentable อย่างไรก็ตาม ต่อต้าน preservative ของยีสต์มีอิทธิพลระดับกลูโคส มีความต้านทานสูงสุดที่ได้รับที่ความเข้มข้นของน้ำตาล 10-20% (w/v) [4] เป็น z. bailii ปานกลาง osmotolerant ระดับเกลือและน้ำตาลในอาหารมักจะไม่เพียงพอในการควบคุมการเจริญเติบโตของ [3] [24] การยอมรับสูงสุดที่ใส่เกลือได้ถูกตรวจสอบที่ค่า pH ต่ำ เช่น NaCl สูงสุดที่ทำให้การเจริญเติบโตได้ 12.5% (w/v) ที่ pH 3.0 ขณะนี้มีเพียง 5.0% (w/v) ที่ pH 5.0 นอกจากนี้ สถานะของเกลือหรือน้ำตาลมีผลบวกในความสามารถของ bailii z.เริ่มเจริญเติบโตที่ระดับ pH มาก เช่นยีสต์ไม่เจริญเติบโตพบว่าที่ pH 2.0 ของ NaCl และซูโครส แต่เติบโตที่ pH 2.5% (w/v) NaCl หรือซูโครส 50% (w/v) นี้ [25]สุด facultatively fermentative ยีสต์ชนิดไม่สามารถเติบโตในการขาดงานที่สมบูรณ์ของออกซิเจน นั่นหมายความว่า อาจมีประโยชน์ในการควบคุมอาหารเน่าเสียเกิดจาก fermentative yeasts จำกัดพร้อมออกซิเจน อย่างไรก็ตาม มันได้ถูกตรวจสอบว่า bailii z.สามารถเติบโตอย่างรวดเร็ว และหมักน้ำตาลดั่งในสื่อที่ซับซ้อนภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนอย่างเคร่งครัด บ่งชี้ว่า ได้ตอบสนองความต้องการทางโภชนาการสำหรับการเติบโตที่ไม่ใช้ส่วนประกอบซับซ้อนปานกลาง ดังนั้น ข้อจำกัดของออกซิเจนเข้าอาหารและเครื่องดื่ม ที่อุดมไปด้วยสารอาหาร ได้กลยุทธ์สัญญาเพื่อป้องกันความเสี่ยงจากการเน่าเสียจากยีสต์นี้ [26] นอกจาก Leyva และ al. (1999) [27] ได้รายงานว่า เซลล์ bailii z.สามารถรักษาความสามารถในการเน่าเสีย โดยผลิตจำนวนก๊าซในไม่เจริญเติบโตอย่างมีนัยสำคัญเงื่อนไข (เช่นสถานะของน้ำตาล) แต่ขาดแหล่งไนโตรเจนกลไกการต้านทาน preservative [แก้ไข]มีการแนะนำกลยุทธ์ต่าง ๆ ในการลงบัญชีสำหรับทนต่อ bailii z.อ่อนกรดสารกันบูด ซึ่งรวมถึง: (i) การสลายตัวของกรด (ii) ป้องกันของรายการหรือของกรดจากเซลล์ (iii) เทียบเป้าหมายผล หรือ amelioration ของสาเหตุความเสียหาย [3] โดยเฉพาะอย่างยิ่ง กลไกต้านทาน intrinsic ของ bailii z.จะสามารถปรับเปลี่ยน ความแข็งแกร่งมาก ฟังก์ชันการทำงานและประสิทธิภาพของพวกเขามีผลกระทบ หรือหยุดดี โดยสภาพแวดล้อมเช่น pH ต่ำ ต่ำสะสม และจำกัดสารอาหาร [4]For a long time, it has been known that Z. bailii can maintain an acid gradient across the cell membrane,[28][29][30] which indicates the induction of a system whereby the cells can reduce the intracellular acid accumulation. According to Warth (1977),[28] Z. bailii uses an inducible, active transport pump to expel acid anions from the cells for counteracting the toxic effects of the acids. As the pump requires energy to function optimally, high sugar levels enhance Z. bailii preservative resistance. Nevertheless, this view was disputed from an observation that the concentration of acid was exactly as predicted from the intracellular, extracellular pH’s and pKa of the acid.[31] Besides, it is unlikely that an active acid extrusion alone would be sufficient to achieve an unequal acid distribution across the cell membrane. Instead, Z. bailii might have developed much more efficient ways of altering its cell membrane to limit the diffusional entry of acids into the cells. This, in turn, will dramatically reduce any need for active extrusion of protons and acid anions, thus saving a lot of energy.[32] Indeed, Warth (1989)[30] has reported that the uptake rate of propionic acid by diffusion in Z. bailii is much lower than in other acid-sensitive yeasts (e.g. Saccharomyces cerevisiae). Hence, it is conceivable that Z. bailii puts more effort on limiting the influx of acids in order to enhance its acid resistance.[32]Another mechanism of Z. bailii to deal with acid challenge is that the yeast uses a plasma membrane H+-adenosine triphosphatase (H+-ATPase) to expel proton from cells, thereby preventing intracellular acidification.[33] In addition, Cole and Keenan (1987) [31] have suggested that Z. bailii resistance includes an ability to tolerate chronic intracellular pH drops. Besides, the fact that the yeast is able to metabolize preservatives may also contribute to its acid tolerance. Regarding the resistance of Z. bailii to SO2, it has been proposed that the cells reduce the concentration of SO2 by producing extracellular sulphite-binding compounds such as acetaldehyde.[5]Metabolism[edit]The fructophilic behaviour is well known in Z. bailii. Unlike most of other yeasts, Z. bailii metabolizes fructose more rapidly than glucose and grows much faster in foods containing ≥ 1% (w/w) of fructose.[4][5] In addition, it has been observed that the alcoholic fermentation under aerobic conditions (the Crabtree effect) in Z. bailii is influenced by the carbon source, i.e. ethanol is produced at a higher rate a

Results (Thai) 2:

เงื่อนไขวัฒนธรรม [แก้ไข]
โดยทั่วไปขนาดกลางที่มีส่วนผสมของน้ำตาลกลูโคสใด ๆ ที่เป็นที่เหมาะสมสำหรับการเพาะเลี้ยงและการนับของยีสต์เช่นกลาง Sabouraud มอลต์สกัดจากวุ้น (กฟน.) ยีสต์กลูโคส tryptone สารสกัดจากวุ้น (TGY) chloramphenicol น้ำตาลในอาหารเลี้ยงเชื้อยีสต์ (YGC) . [13] สำหรับการตรวจสอบของยีสต์ทนกรดเช่น bailii ซีสื่อกรดมีการแนะนำเช่นการไฟฟ้านครหลวงหรือ TGY 0.5% (v / v) กรดอะซิติกเพิ่ม. [10] [14] ชุบกับสื่อเป็นวุ้น มักจะใช้สำหรับการนับยีสต์ที่มีพื้นผิวการแพร่กระจายเทคนิคเป็นที่นิยมวิธีการเทแผ่นเพราะเทคนิคอดีตให้การฟื้นตัวที่ดีขึ้นของเซลล์ที่มีข้อผิดพลาดในการลดสัดส่วนที่ต่ำกว่า. [15] เงื่อนไขการบ่มทั่วไปบรรยากาศแอโรบิกที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นระยะเวลา 5 วัน อย่างไรก็ตามอุณหภูมิบ่มสูง (30 ° C) และเวลาฟักตัวสั้น (3 วัน) สามารถนำมาใช้สำหรับ bailii ซีเป็นยีสต์ที่เติบโตขึ้นอย่างรวดเร็วที่อุณหภูมิสูงนี้. [14] คุณสมบัติทางสรีรวิทยา [แก้ไข] ท่ามกลาง Zygosaccharomyces ชนิดเน่าเสีย , bailii ซีมีคุณสมบัติที่เด่นชัดมากที่สุดและมีความหลากหลายลักษณะต้านทานทำให้มันจะอยู่รอดและแพร่หลายในสภาวะที่เครียดมาก ปรากฏว่าซี bailii ชอบสภาพแวดล้อมระบบนิเวศที่โดดเด่นด้วยสภาพออสโมติกสูง อธิบายบ่อยที่สุดอยู่อาศัยตามธรรมชาติแห้งหรือผลไม้หมัก exudates ต้นไม้ (ในไร่องุ่นและสวนผลไม้) และขั้นตอนต่างๆของการกลั่นน้ำตาลและการผลิตน้ำเชื่อม. [4] นอกจากนี้ยังไม่ค่อยจะพบ bailii ซีเป็นตัวแทนการเน่าเสียที่สำคัญ ในอาหารที่ยังไม่ได้; มักจะยีสต์เพียงบรรลุความสำคัญในผลิตภัณฑ์การประมวลผลเมื่อการแข่งขันกับเชื้อแบคทีเรียและเชื้อราจะลดลงจากปัจจัยภายในเช่นค่า pH กิจกรรมทางน้ำ (มีอั) สารกันบูด ฯลฯ [16] ลักษณะต้านทาน [แก้ไข] คุณลักษณะที่โดดเด่นของซี bailii ความต้านทานที่โดดเด่นในการสารกันบูดกรดอ่อนที่ใช้กันทั่วไปในอาหารและเครื่องดื่มเช่นอะซิติกแลคติกโพรพิโอนิ, เบนโซอิกกรดซอร์บิกและก๊าซซัลเฟอร์ไดออกไซด์ นอกจากนี้ยังมีรายงานว่ายีสต์สามารถที่จะทนต่อความเข้มข้นของเอทานอลสูง (≥ 15% (v / v)) . ช่วงของค่าความเป็นกรดและอัสำหรับการเจริญเติบโตมีความกว้าง 2.0-7.0 และ 0.80-0.99 ตามลำดับ [4] นอกจากนี้ยังเป็นที่ทนสารกันบูดคุณสมบัติอื่น ๆ ที่นำไปสู่ความสามารถในการเน่าเสียของ bailii ซีมีดังนี้: (i) ความสามารถในการอย่างจริงจัง น้ำตาล hexose หมัก (เช่นกลูโคสและฟรุกโตส), (ii) ความสามารถในการก่อให้เกิดการเน่าเสียจากเชื้อที่ต่ำมาก (เช่นเซลล์หนึ่งที่ทำงานได้ต่อแพคเกจที่มีขนาดใด), (iii) osmotolerance ปานกลาง (เมื่อเทียบกับ Zygosaccharomyces rouxii). [3] ดังนั้นอาหารที่มีความเสี่ยงโดยเฉพาะอย่างยิ่งที่จะเน่าเสียโดยยีสต์นี้มักจะมีค่า pH ต่ำ (2.5-5.0) อัต่ำและมีปริมาณที่เพียงพอของน้ำตาลหมัก. [5] ต้านทานกรดมากของ bailii ซีได้รับรายงานจากผู้เขียนหลาย หลายต่อหลายครั้งการเจริญเติบโตของยีสต์ได้รับการปฏิบัติในแอลกอฮอล์ผลไม้ตาม (pH 2.8-3.0, 40-45% (w / v) ซูโครส) เก็บรักษาไว้กับ 0.08% (w / v) กรดเบนโซอิก [10] และใน เครื่องดื่ม (pH 3.2) ที่มีทั้ง 0.06% (w / v) กรดซอร์บิ 0.07% (w / v) กรดเบนโซอิกหรือ 2% (w / v) กรดอะซิติก. [17] [18] ยวดแต่ละเซลล์ในการใด ๆ ซี bailii ประชากรแตกต่างกันอย่างมากในความต้านทานต่อกรดซอร์บิกที่มีส่วนเล็ก ๆ สามารถที่จะเจริญเติบโตได้ในระดับสารกันบูดสองเท่าของประชากรเฉลี่ย. [19] ในบางชนิดของอาหารยีสต์เป็นยังสามารถที่จะเจริญเติบโตได้ในการปรากฏตัวของ เบนโซอิกและกรดซอร์บิกที่ความเข้มข้นสูงกว่าที่ได้รับอนุญาตถูกต้องตามกฎหมายและที่ค่าพีเอชต่ำกว่า pKa ของกรด. [5] ตัวอย่างเช่นตามไปยังสหภาพยุโรป (EU) กฎหมายกรดซอร์บิถูก จำกัด ไว้ที่ 0.03% (w / v) ในเครื่องดื่ม (pH 2.5-3.2); [20] แต่ซี bailii สามารถเจริญเติบโตได้ในเครื่องดื่มที่มี 0.05% (w / v) ของกรดนี้ (pKa 4.8) [21] โดยเฉพาะอย่างยิ่งมีหลักฐานที่แข็งแกร่งที่ต้านทาน. ของซี bailii ถูกกระตุ้นโดยการปรากฏตัวของสารกันบูดหลาย ดังนั้นยีสต์สามารถอยู่รอดและความพ่ายแพ้สารกันบูดรวมกันทำงานร่วมกันที่ปกติให้มีเสถียรภาพทางจุลชีววิทยาการอาหารแปรรูป มันได้รับการตั้งข้อสังเกตว่าการดูดซึมกรดอะซิติกโทรศัพท์มือถือถูกยับยั้งเมื่อซอร์บิกหรือกรดเบนโซอิคเป็น บริษัท ในอาหารเลี้ยงเชื้อ ในทำนองเดียวกันระดับเอทานอลได้ถึง 10% (v / v) ไม่มีผลต่อกระทบซอร์บิกและความต้านทานต่อกรดเบนโซอิกของยีสต์ที่ pH 4.0 -. 5.0 [4] นอกจากนี้ Sousa et al, (1996) [22] ได้พิสูจน์ให้เห็นว่าใน bailii ซีเอทานอลมีบทบาทป้องกันผลกระทบเชิงลบของกรดอะซิติกโดยการยับยั้งการขนส่งและการสะสมของกรดนี้ภายในเซลล์. เช่นเดียวกับจุลินทรีย์อื่น ๆ , ซี bailii มีความสามารถในการปรับตัวเข้ากับ ระดับย่อยยับยั้งของสารกันบูดซึ่งจะช่วยให้ยีสต์เพื่อความอยู่รอดและการเติบโตในระดับความเข้มข้นที่สูงมากของสารกันบูดกว่าก่อนการปรับตัว. [3] [10] นอกจากนี้ดูเหมือนว่าต้านทานซี bailii ไปอะซิติก, เบนโซอิกและกรดโพรพิโอนิ มีความสัมพันธ์อย่างเป็นเซลล์ที่ได้รับการปรับให้เข้ากับกรดเบนโซอิกยังแสดงให้เห็นความคลาดเคลื่อนที่เพิ่มขึ้นไปที่อื่น ๆ กันบูด. [23] บางการศึกษาแสดงให้เห็นผลกระทบที่สำคัญของน้ำตาลแตกต่างกันในความต้านทานต่อสารกันบูดของ bailii ซีเช่นซอร์บิเปรียบและความต้านทานต่อกรดเบนโซอิก ก็สังเกตเห็นโดยไม่คำนึงว่าเซลล์ที่ถูกปลูกในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีน้ำตาลกลูโคสฟรุกโตสหรือเป็นสารตั้งต้นย่อย อย่างไรก็ตามต้านทานสารกันบูดของยีสต์เป็นผลมาจากระดับน้ำตาลที่มีความต้านทานสูงสุดได้ที่ 10-20% (w / v) ความเข้มข้นของน้ำตาล [4] ในฐานะที่เป็นซี bailii ปานกลาง osmotolerant ระดับเกลือและน้ำตาลในอาหารมี. มักจะไม่เพียงพอที่จะควบคุมการเจริญเติบโตของมัน. [3] [24] ความอดทนสูงสุดให้กับเกลือได้รับการปฏิบัติที่ค่าพีเอชต่ำเช่นช่วยให้การเจริญเติบโตสูงสุดโซเดียมคลอไรด์เป็น 12.5% ​​(w / v) ที่ pH 3.0 ในขณะนี้เป็นเพียง 5.0% ( w / v) ที่ pH 5.0 นอกจากนี้ยังมีการปรากฏตัวของทั้งเกลือหรือน้ำตาลมีผลบวกกับความสามารถของ bailii ซีที่จะเริ่มต้นการเจริญเติบโตในระดับพีเอชที่รุนแรงเช่นยีสต์พบว่าไม่มีการเจริญเติบโตที่ pH 2.0 ในกรณีที่ไม่มีโซเดียมคลอไรด์และน้ำตาลซูโครส แต่เติบโตที่ pH นี้ 2.5% (w / v) หรือโซเดียมคลอไรด์ 50% (w / v) ซูโครส. [25] ส่วนใหญ่ facultatively หมักยีสต์สายพันธุ์ที่ไม่สามารถเจริญเติบโตได้ในกรณีที่ไม่มีที่สมบูรณ์ของออกซิเจน นั่นหมายความว่าข้อ จำกัด ของออกซิเจนอาจจะมีประโยชน์ในการควบคุมการเน่าเสียของอาหารที่เกิดจากการหมักยีสต์ แต่ได้รับการปฏิบัติที่ bailii ซีสามารถที่จะเติบโตอย่างรวดเร็วและการหมักน้ำตาลอย่างจริงจังในกลางภายใต้เงื่อนไขที่ซับซ้อนแบบไม่ใช้ออกซิเจนอย่างเคร่งครัดแสดงให้เห็นว่าความต้องการทางโภชนาการสำหรับการเจริญเติบโตแบบไม่ใช้ออกซิเจนได้พบกับชิ้นส่วนที่ซับซ้อนขนาดกลาง ดังนั้นข้อ จำกัด ของรายการออกซิเจนเข้าไปในอาหารและเครื่องดื่มที่อุดมไปด้วยสารอาหารที่ไม่ได้เป็นกลยุทธ์ที่มีแนวโน้มที่จะป้องกันความเสี่ยงจากการเน่าเสียโดยยีสต์นี้. [26] นอกจากนี้ Leyva et al, (1999) [27] มีรายงานว่าเซลล์ซี bailii สามารถรักษาความสามารถในการเน่าเสียของพวกเขาโดยการผลิตเป็นจำนวนมากของก๊าซแม้ในสภาวะที่ไม่เติบโต (เช่นการปรากฏตัวของน้ำตาล แต่กรณีที่ไม่มีแหล่งไนโตรเจน). กลไกการต้านทานสารกันบูด [แก้ไข] ที่แตกต่างกัน กลยุทธ์ได้รับการแนะนำในการบัญชีสำหรับซี bailii ต้านทานสารกันบูดกรดอ่อนซึ่งรวมถึง: (i) การสลายตัวของกรด (ii) การป้องกันของรายการหรือการกำจัดของกรดจากเซลล์ (iii) การเปลี่ยนแปลงของเป้าหมายยับยั้ง, หรือการแก้ปัญหาความเสียหายที่เกิด. [3] โดยเฉพาะอย่างยิ่งความต้านทานกลไกที่แท้จริงของ bailii ซีปรับตัวเป็นอย่างมากและมีประสิทธิภาพ การทำงานและประสิทธิภาพของพวกเขาจะได้รับผลกระทบหรือเก็บกดเล็กน้อยจากสภาพแวดล้อมเช่นค่า pH ต่ำต่ำอั จำกัด และสารอาหาร. [4] เป็นเวลานานจะได้รับรู้กันว่า bailii ซีสามารถรักษาลาดกรดข้ามเยื่อหุ้มเซลล์ [ 28] [29] [30] ซึ่งบ่งชี้ว่าการเหนี่ยวนำของระบบเซลล์โดยสามารถลดการสะสมของกรดในเซลล์ ตาม Warth (1977) [28] ซี bailii ใช้ inducible ปั๊มขนส่งการใช้งานที่จะขับไล่แอนไอออนกรดจากเซลล์สำหรับ counteracting พิษของกรด ในฐานะที่เป็นเครื่องสูบน้ำที่ต้องใช้พลังงานเพื่อให้สามารถทำงานได้อย่างดีที่สุดระดับน้ำตาลสูงเพิ่มความต้านทานสารกันบูดซี bailii อย่างไรก็ตามมุมมองนี้แน่นอนจากการสังเกตที่ความเข้มข้นของกรดเป็นสิ่งที่คาดการณ์ไว้จากภายในเซลล์ค่า pH extracellular และ pKa ของกรด. [31] นอกจากนี้ก็ไม่น่าที่การอัดขึ้นรูปกรดที่ใช้งานเพียงอย่างเดียวจะเพียงพอที่จะประสบความสำเร็จ กรดกระจายไม่เท่ากันทั่วเยื่อหุ้มเซลล์ แต่ซี bailii อาจมีการพัฒนาวิธีที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นในการแก้ไขเยื่อหุ้มเซลล์ในการ จำกัด การแพร่รายการของกรดเข้าสู่เซลล์ นี้ในทางกลับกันอย่างมากจะช่วยลดความจำเป็นใด ๆ สำหรับการอัดขึ้นรูปที่ใช้งานของโปรตอนและแอนไอออนกรดทำให้ประหยัดพลังงานมาก. [32] แท้จริง Warth (1989) [30] มีรายงานว่าอัตราการดูดซึมของกรดโพรพิโอนิโดยการแพร่ใน ซี bailii มากต่ำกว่าในยีสต์กรดที่สำคัญอื่น ๆ (เช่น Saccharomyces cerevisiae) ดังนั้นจึงเป็นไปได้ว่า bailii ซีทำให้ความพยายามมากขึ้นในการ จำกัด การไหลบ่าเข้ามาของกรดเพื่อเพิ่มความต้านทานกรด [32]. กลไกหนึ่งของ bailii ซีที่จะจัดการกับความท้าทายคือการที่กรดยีสต์ใช้เยื่อหุ้ม H + - adenosine triphosphatase (H + ATPase นา) ที่จะขับไล่โปรตอนจากเซลล์จึงช่วยป้องกันเซลล์กรด. [33] นอกจากนี้โคลและคีแนนส์ (1987) [31] ได้ชี้ให้เห็นว่าการต่อต้านซี bailii รวมถึงความสามารถในการทนต่อการลดลงค่า pH ในเซลล์เรื้อรัง นอกจากความจริงที่ว่ายีสต์สามารถที่จะเผาผลาญสารกันบูดยังอาจนำไปสู่ความอดทนกรด เกี่ยวกับความต้านทานของ bailii ซีจะ SO2 จะได้รับการเสนอว่าเซลล์ลดความเข้มข้นของ SO2 โดยการผลิตสารประกอบซัลไฟต์ที่มีผลผูกพัน extracellular เช่น acetaldehyde. [5] การเผาผลาญ [แก้ไข] พฤติกรรม fructophilic เป็นที่รู้จักกันดีในซี bailii . ซึ่งแตกต่างจากส่วนใหญ่ของยีสต์อื่น ๆ ซี bailii metabolizes fructose ขึ้นอย่างรวดเร็วกว่ากลูโคสและเติบโตได้เร็วขึ้นมากในอาหารที่มี≥ 1% (w / w) ของฟรุกโตส. [4] [5] นอกจากนี้ยังได้รับการตั้งข้อสังเกตว่าการหมักแอลกอฮอล์ ภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก (ผล Crabtree) ใน bailii ซีได้รับอิทธิพลจากแหล่งคาร์บอนเช่นเอทานอลที่ผลิตในอัตราที่สูงขึ้น

Results (Thai) 3:

สภาพการเลี้ยง [ แก้ไข ]
โดยทั่วไปใด ๆที่ประกอบด้วยกลูโคสขนาดกลางเหมาะสำหรับเพาะและนับเชื้อยีสต์ เช่น sabouraud กลาง , malt extract agar ( กฟน. ) ทริพโทนน้ำตาลยีสต์สกัดวุ้น , วุ้นคลอแรมเฟนิคอล ( tgy ) ยีสต์กลูโคส ( ygc ) [ 13 ] การตรวจหากรดป้องกันยีสต์ เช่น bailii Z ปรับ , สื่อควร เช่นแม่หรือ tgy กับ 05% ( v / v ) กรดอะซิติกเพิ่ม [ 10 ] [ 14 ] ชุบกับวุ้นสื่อมักจะใช้สำหรับการนับของยีสต์กับพื้นผิวกระจายเทคนิคดีกว่าเทวิธีจานเพราะเทคนิคอดีตให้การกู้คืนที่ดีของเซลล์ที่มีข้อผิดพลาดการลดลง . [ 15 ] สภาพดินทั่วไปมีบรรยากาศแอโรบิก อุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 5 วัน อย่างไรก็ตามมีอุณหภูมิสูงกว่า 30 องศา C ) และเวลาในการบ่มสั้น ( 3 วัน ) สามารถนำมาใช้สำหรับ Z bailii เป็นยีสต์เติบโตเร็วกว่าที่อุณหภูมิสูงนี้ . [ 14 ]

สรีรสมบัติ [ แก้ไข ]
ของ zygosaccharomyces ของเสียชนิด ซี bailii ครบถ้วนออกเสียงมากที่สุดและหลากหลายลักษณะต้านทานให้มัน อยู่รอดและเพิ่มจำนวนในสภาวะเครียดมากปรากฏว่า Z bailii ชอบระบบนิเวศสภาพแวดล้อมลักษณะเงื่อนไขการสูง ที่สุดมักอธิบายถิ่นอาศัยตามธรรมชาติแห้งหรือผลไม้หมัก สารที่หลั่งต้นไม้ ( ในไร่องุ่นและสวนผลไม้ ) และขั้นตอนต่างๆของการกลั่นน้ำตาลและการผลิตน้ำเชื่อม [ 4 ] นอกจากนี้ จะไม่ค่อยพบ Z bailii เป็นตัวแทนหลักในอาหารที่ไม่ผ่านการเน่าเสีย ;โดยปกติยีสต์เพียงได้รับความสำคัญในผลิตภัณฑ์แปรรูปเมื่อการแข่งขันกับแบคทีเรียและเชื้อราจะลดลงจากปัจจัยภายใน เช่น pH , กิจกรรมน้ำ ( AW ) สารกันบูด ฯลฯ [ 16 ]

คุณสมบัติการต้านทาน [ แก้ไข ]
มีคุณลักษณะโดดเด่นของ Z bailii เป็นพิเศษ ทนต่อกรดอ่อนเจือที่ใช้กันทั่วไปในอาหารและ เครื่องดื่ม เช่น กรดแลคติกโพรพิออนิก ,เบนโซอิก , กรดซอร์บิค และซัลเฟอร์ไดออกไซด์ นอกจากนี้ มีรายงานว่ายีสต์สามารถทนต่อปริมาณเอทานอลสูง ( ≥ 15 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) ) ช่วงของพีเอช และโถสำหรับการเจริญเติบโตกว้าง 2.0 - 7.0 และ 0.80 - 0.99 ตามลำดับ [ 4 ] นอกจากป้องกัน สารกันบูด คุณลักษณะอื่น ๆที่มีส่วนร่วมในการ bailii : ความจุของ Z( 1 ) ความสามารถในการอย่างแข็งขัน หมักน้ำตาลเฮกโซส ( เช่นกลูโคสและฟรักโทส ) , ( 2 ) ความสามารถในการก่อให้เกิดการเน่าเสียจากปริมาณที่น้อยมาก ( เช่นหนึ่งที่มีเซลล์ต่อแพคเกจของขนาดใด ๆ ) , ( 3 ) osmotolerance ปานกลาง ( เปรียบเทียบกับ zygosaccharomyces rouxii ) [ 3 ] ดังนั้น อาหารที่มีความเสี่ยงใด การเน่าเสียโดยยีสต์นี้มักจะมี pH ต่ำ ( 2.5 - 5.0 )