plants tested (six), except Bt2 whi

plants tested (six), except Bt2 which showed a single-copy
insertion. Multiple-copy genotypes could result from insertions
at di!erent loci along the chromosomes or at the
same locus. The origin of multiplicity at a single locus
remains unknown, although copy organization is either
in tandem or as inverted repeats at a given locus (Delroles
and Gardner, 1988). The hybridization pattern in
the plants Bt5 and Bt6 was similar indicating that these
two plants probably arose from a single transformation
event. As expected, the non-transgenic tomato plant
DNA (Fig. 2, lane C) did not show any hybridization
signal.
Double-antibody sandwich ELISA analysis was performed
using polyclonal rabbit antibodies speci"c for
Cry1Ac protein to detect the levels of toxin expression in
the transgenic plants. Toxin levels ranged from 0.04 to
0.41% of total soluble protein (Table 1). The maximum
level of Cry1Ac expression reported here (0.41% of the
total soluble protein) is among the highest reported in
the literature (Schuler et al., 1998). Various plant species
transformed with synthetic Bt genes under the control of
constitutive promoters such as CaMV 35S exhibited
a wide range of levels of foreign protein expression. For
example, out of total soluble protein, 0.1% of Cry3A in
potato (Adang et al., 1993), 0.03% of Cry1Ab in tobacco
(Perlak et al., 1991), 0.05% of Cry1Ab in rice (Fujimoto
et al., 1993), 0.4% of Cry1Ab in maize (Koziel et al., 1993)
and 0.4% of Cry1Ac in canola (Stewart et al., 1996) were
observed. Recently, Cheng et al. (1998) reported extraordinary
levels of Cry1Ac expression (3% of the total
soluble protein) in transgenic rice, the maximum level of
Bt gene expression obtained to date, by nuclear transformation.
McBride et al. (1995) demonstrated an alternative
to the usage of synthetic Bt genes by engineering
a native cry1Ac into tobacco chloroplasts, yielding transgenic
plants with 3}5% of Cry1Ac protein. In another
recent report dealing with transplastomic tobacco, Kota
et al. (1999) have expressed Cry2Aa protein up to 2}3%

Results (Thai) 2:

พืชทดสอบ (หก) ยกเว้น 2
บาทซึ่งแสดงให้เห็นสำเนาเดียวแทรก ยีนหลายสำเนาอาจเป็นผลมาจากการแทรกที่ดิ! ตำแหน่งต่างกันไปตามโครโมโซมหรือที่สถานที่เดียวกัน ที่มาของความหลายหลากในสถานที่เดียวที่ยังไม่ทราบถึงแม้ว่าองค์กรสำเนาเป็นทั้งควบคู่หรือเป็นซ้ำคว่ำในสถานที่ที่กำหนด(Delroles และการ์ดเนอร์, 1988) รูปแบบการผสมพันธุ์ในพืช 5 บาทและ 6 บาทเป็นที่คล้ายกันแสดงให้เห็นว่าสิ่งเหล่านี้สองพืชอาจจะเกิดขึ้นจากการเปลี่ยนแปลงเดียวเหตุการณ์ เป็นที่คาดหวังมะเขือเทศที่ไม่ใช่พันธุ์พืชดีเอ็นเอ (รูป. 2 เลน C) ไม่ได้แสดงพันธุ์ใด ๆ สัญญาณ. การวิเคราะห์วิธี ELISA แซนวิชดับเบิลแอนติบอดีที่ได้ดำเนินการโดยใช้แอนติบอดีกระต่ายโพลีspeci "C สำหรับโปรตีนCry1Ac ในการตรวจสอบระดับการแสดงออกของสารพิษ ในพืชดัดแปรพันธุกรรม. ระดับสารพิษตั้งแต่ 0.04 ที่จะ0.41% ของโปรตีนที่ละลายได้ทั้งหมด (ตารางที่ 1). สูงสุดที่ระดับของการแสดงออกCry1Ac รายงานนี่ (0.41% ของโปรตีนที่ละลายน้ำได้ทั้งหมด) เป็นหนึ่งในรายงานสูงสุดในวรรณคดี (ชูเลอร์และ al., 1998). พันธุ์พืชต่าง ๆ เปลี่ยนกับยีนบาทสังเคราะห์ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์เป็นส่วนประกอบเช่น CaMV 35S จัดแสดงความหลากหลายของระดับของการแสดงออกของโปรตีนต่างประเทศ. สำหรับตัวอย่างเช่นจากโปรตีนที่ละลายน้ำได้ทั้งหมด 0.1% ของ Cry3A ในมันฝรั่ง(อาดัง et al., 1993) 0.03% ของ Cry1Ab ในยาสูบ(Perlak et al., 1991), 0.05% ของ Cry1Ab ข้าว (Fujimoto et al., 1993), 0.4% ของ Cry1Ab ในข้าวโพด (Koziel et al, , 1993) และ 0.4% ของ Cry1Ac ในคาโนลา (สจ๊วต et al., 1996) ได้รับการตั้งข้อสังเกต. เมื่อเร็ว ๆ นี้ Cheng et al, (1998) รายงานพิเศษระดับของการแสดงออกCry1Ac (3% ของทั้งหมดโปรตีนที่ละลายน้ำได้) ในข้าวดัดแปรพันธุกรรมในระดับสูงสุดของการแสดงออกของยีนบาทถึงวันที่ได้รับโดยการเปลี่ยนแปลงนิวเคลียร์. ไบรด์ et al, (1995) แสดงให้เห็นถึงทางเลือกในการใช้งานของยีนสังเคราะห์บาทโดยวิศวกรรมcry1Ac พื้นเมืองเข้าไปในคลอโรพลายาสูบพันธุ์ที่ให้ผลผลิตพืชที่มี3} 5% ของโปรตีน Cry1Ac ในอีกรายงานล่าสุดจัดการกับยาสูบ transplastomic, โกตา et al, (1999) ได้แสดงความโปรตีน Cry2Aa ถึง 2} 3%

Results (Thai) 3:

พืชทดสอบ ( 6 ) ยกเว้น 2 ซึ่งพบว่ามีการคัดลอก
โสด คัดลอกหลายสายพันธุ์ อาจเป็นผลมาจากการแทรก
ที่ดิ ! erent โลกัสตามโครโมโซม หรือที่
ความเชื่อเดียวกัน ที่มาของความหลากหลายที่
ความเชื่อเดียวยังคงไม่ทราบแน่ชัด แม้ว่าองค์กรคัดลอกทั้ง
ตีคู่ หรือคว่ำซ้ำที่ระบุสถานที่ ( delroles
and Gardner , 1988 ) การทำลวดลายแบบ
พืชและคล้ายคลึงกันระบุว่า เนื่องจากโครงการเหล่านี้
สองพืชอาจเกิดขึ้นจากเหตุการณ์การเปลี่ยนแปลง
โสด อย่างที่คาดไว้ ไม่ใช่พันธุกรรมพืช
มะเขือเทศดีเอ็นเอ ( รูปที่ 2 , Lane C ) ไม่แสดงใด ๆ (

) แอนติบอดีแซนวิชสองสัญญาณ การวิเคราะห์การใช้แอนติบอดีกระต่าย

" C cry1ac ประเภทโปรตีนเพื่อตรวจหาระดับของสารพิษในสำนวน
พืชดัดแปรพันธุกรรม . สารพิษระดับมีค่า 0.04
0.41 % ของปริมาณโปรตีน ( ตารางที่ 1 ) สูงสุดระดับการแสดงออกของ cry1ac
รายงานที่นี่ ( 0.41% จาก
ปริมาณโปรตีนที่ละลายในน้ำ ) เป็นหนึ่งในที่สูงที่สุดในการรายงาน
วรรณคดี ( Schuler et al . , 1998 ) พืชชนิดต่างๆ
อาหารสังเคราะห์ยีนบาทภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์และ

เช่น 35S CaMV มีช่วงกว้างของระดับการแสดงออกของโปรตีนในต่างประเทศ สำหรับ
ตัวอย่าง ของปริมาณโปรตีนที่ละลายในน้ำ , 0.1% ของ cry3a ใน
มันฝรั่ง ( อาดัง et al . , 1993 ) , 0.03 % ของ cry1ab ยาสูบ
( เปอร์ลัก et al . , 1991 ) , 0.05 % ของ cry1ab ในข้าว ( ฟูจิโมโตะ
et al . , 1993 ) 0.4% ของ cry1ab ในข้าวโพด ( koziel et al . , 1993 )
และ 0.4% ของ cry1ac ในคาโนล่า ( Stewart et al . , 1996 )
) เมื่อเร็วๆ นี้ เฉิง et al .( 1998 ) รายงานพิเศษ
ระดับการแสดงออกของ cry1ac ( 3% ของปริมาณโปรตีนที่ละลายในน้ำ
) ในข้าวพันธุ์ , สูงสุดที่ระดับของการแสดงออกของยีน
BT ได้วันที่โดยการแปรนิวเคลียส .
แมคไบรด์ et al . ( 1995 ) แสดงให้เห็นถึงทางเลือกในการใช้ยีนบีที

cry1ac สังเคราะห์โดยวิศวกรรมพื้นเมืองในคลอโรพลาสต์ ยาสูบ พืชให้ผลผลิตต้น
3 } 5 % โปรตีน cry1ac .ในรายงานล่าสุดอีก

ติดต่อกับทราน พลาสโตมิคยาสูบ โกตา et al . ( 1999 ) ได้แสดง cry2aa โปรตีนถึง 2 } 3 เปอร์เซ็นต์