Many protein allergens are glycosyl

Many protein allergens are glycosylated, raising the possibility
that the glycosyl groups may contribute to their allergenicity
(Jenkins et al., 1996). This is potentially relevant when considering
the allergenicity of novel proteins for which glycosylation patterns
may differ substantially from their native counterparts. The search
for potential N-glycosylation sites found four such sites on the
Cry1Ab/Ac protein but in vitro assays proved that there was no
N-glycosylation site on the Cry1Ab/Ac protein actually.
With the exception of pollen protein, all allergenic proteins
have high stability to digestive enzymes. Therefore this stability
can be used as an indicator of the potential of a protein being an
allergen (Astwood, 1996). It has been reported that proteins that
are rapidly hydrolyzed to peptides and single amino acids smaller
than 3.5 kDa by pepsin can be considered less likely to be allergenic
(Fu et al., 2002). And if protein allergens are to reach and pass
through the intestine mucosa to elicit an allergenic response, they
must be able to resist peptic and tryptic digestion and the acid conditions
of the digestive system. The Cry1Ab/Ac protein was degraded
rapidly by digestive enzymes as assessed by both SDS–
PAGE and Western Blot. These results suggest, but do not prove,
that the protein has no allergenic activity, since the correlation between
resistance to proteolysis and allergenic activity is not absolute
(Fu et al., 2002).
The recombinant protein was used in this paper to assess the
safety of Cry1Ab/Ac protein. The result obtained from structural
and functional equivalence assay explain that the recombinant
protein produced from E. coli was an appropriate substitute for
the extracted protein directly from genetically modified rice. Heat
stability study showed the same recognition of the heat-treated
and the native proteins by anti-Cry1Ab/Ac antibodies indicated
that the conformational changes associated with denaturation
did not affect the epitope accessibility which means that the epitope
homology search, which showed no similarities with known
allergenic epitopes, has a major weight of evidence in this safety
assessment. To have a direct assessment of the protein toxicity in
mammals, an oral acute study in mice is used for evaluating the
safety of the Cry1Ab/Ac protein. In this study, the mouse acute oral
LD50 was >5000 mg kg1 (body weight), which belongs to practically
non-toxic grade. The results are coincidence with Delaney
et al. (2008) which showed the results from acute mouse toxicology
studies with proteins in GM crops were: Cry1Ab > 4000 (oral)
and Cry1Ac > 4200 (oral). These results indicated that the Cry1Ab/
Ac protein has no harm to human beings and animal.

Results (Thai) 1:

ในโปรตีนสารก่อภูมิแพ้ glycosylated เพิ่มโอกาสว่ากลุ่ม glycosyl อาจนำไปสู่การ allergenicity ของพวกเขา(เจงกินส์ et al., 1996) ซึ่งจะเกี่ยวข้องอาจพิจารณาallergenicity ของโปรตีนนวนิยายในรูปแบบใด glycosylationอาจแตกต่างกันมากจากคู่ของพวกเขาเป็น การค้นหาสำหรับ N glycosylation เป็น ไซต์พบ 4 เว็บไซต์ดังกล่าวในการCry1Ab/Ac โปรตีนแต่ใน assays พิสูจน์ว่า มีไม่N-glycosylation เว็บไซต์บนโปรตีน Cry1Ab/Ac จริงยกเว้นโปรตีนละอองเกสร แพ้โปรตีนทั้งหมดมีความมั่นคงสูงกับเอนไซม์ช่วยย่อยอาหาร ความมั่นคงดังนี้สามารถใช้เป็นตัวบ่งชี้ศักยภาพของโปรตีนมีการallergen (Astwood, 1996) มีรายงานว่า โปรตีนที่อย่างรวดเร็วมี hydrolyzed เปปไทด์และกรดอะมิโนเดี่ยวขนาดเล็กกว่า 3.5 kDa ตามเพพซินถือได้ว่าไม่น่าจะแพ้(ฟูและ al., 2002) และ ถ้าโปรตีนสารก่อภูมิแพ้จะเข้าถึง และผ่านผ่าน mucosa ลำไส้เพื่อให้ได้รับการตอบสนองที่แพ้ พวกเขาต้องสามารถต้านทานการย่อยอาหาร peptic และ tryptic และเงื่อนไขกรดของระบบย่อยอาหาร โปรตีน Cry1Ab/Ac ที่เสื่อมโทรมอย่างรวดเร็ว โดยเอนไซม์ช่วยย่อยอาหารเป็นราคาประเมินโดยองค์กรทั้ง-หน้าและคืนในตาตะวันตก ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำ แต่ไม่ พิสูจน์ว่า โปรตีนมีไม่แพ้กิจกรรม ตั้งแต่ความสัมพันธ์ระหว่างทนต่อ proteolysis และกิจกรรมแพ้ไม่แน่นอน(ฟูและ al., 2002)Recombinant โปรตีนถูกใช้ในเอกสารนี้เพื่อประเมินการความปลอดภัยของโปรตีน Cry1Ab/Ac ผลที่ได้รับจากโครงสร้างและทดสอบเทียบเท่าหน้าที่อธิบายที่วททชโปรตีนที่ผลิตจาก E. coli ถูกทดแทนเหมาะสมโปรตีนที่แยกจากข้าวดัดแปลงพันธุกรรมโดยตรง ความร้อนความมั่นคงศึกษาพบว่าการรับรู้ที่เหมือนกันของที่ heat-treatedและระบุโปรตีนดั้งเดิม โดยแอนตี้ต่อต้าน-Cry1Ab/Acที่เปลี่ยนแปลง conformational สัมพันธ์กับ denaturationไม่มีผลต่อถึง epitope ซึ่งหมายความ ว่า epitopeค้นหา homology ซึ่งแสดงให้เห็นความไม่เหมือนกับที่รู้จักกันepitopes แพ้ มีน้ำหนักความสำคัญของหลักฐานด้านความปลอดภัยนี้การตรวจประเมิน ต้องมีการประเมินความเป็นพิษของโปรตีนในโดยตรงเลี้ยงลูกด้วยนม การศึกษาปากเฉียบพลันในหนูจะใช้ในการประเมินการความปลอดภัยของโปรตีน Cry1Ab/Ac ในการศึกษานี้ ปากเฉียบพลันของเมาส์มี LD50 > 5000 มก.กก. 1 (น้ำหนัก), ซึ่งเป็นของจริงชั้นประถมศึกษาปีพิษ ผลลัพธ์ไม่สอดคล้องต้องกันกับเดลานีย์al. ร้อยเอ็ด (2008) ซึ่งแสดงให้เห็นผลลัพธ์จากพิษวิทยาเมาส์เฉียบพลันได้ศึกษากับโปรตีนในพืชจีเอ็ม: Cry1Ab > 4000 (ปาก)และ Cry1Ac > 4200 (ปาก) ผลลัพธ์เหล่านี้ระบุที่ Cry1Ab /โปรตีน Ac ไม่ทำร้ายมนุษย์และสัตว์ได้

Results (Thai) 2:

สารก่อภูมิแพ้โปรตีนหลายคนกำลัง glycosylated
เพิ่มความเป็นไปได้ว่ากลุ่มglycosyl อาจนำไปสู่ภูมิแพ้ของพวกเขา
(เจนกินส์ et al., 1996) นี้อาจมีความเกี่ยวข้องเมื่อพิจารณาภูมิแพ้โปรตีนนวนิยายที่รูปแบบ glycosylation อาจแตกต่างอย่างมากจากคู่แม่ของพวกเขา ค้นหาศักยภาพเว็บไซต์ N-glycosylation พบสี่เว็บไซต์ดังกล่าวใน Cry1Ab / โปรตีน Ac แต่ในการตรวจหลอดทดลองได้รับการพิสูจน์ว่าไม่มีเว็บไซต์N-glycosylation ใน Cry1Ab / โปรตีน Ac จริง. ด้วยข้อยกเว้นของโปรตีนเกสรโปรตีนที่เป็นภูมิแพ้ทั้งหมดมีมีความมั่นคงสูงที่จะเอนไซม์ย่อยอาหาร ดังนั้นความมั่นคงนี้สามารถใช้เป็นตัวบ่งชี้ศักยภาพของโปรตีนที่เป็นสารก่อภูมิแพ้(Astwood, 1996) มันได้รับรายงานว่าโปรตีนที่มีการไฮโดรไลซ์อย่างรวดเร็วเปปไทด์และกรดอะมิโนเดี่ยวที่มีขนาดเล็กกว่า3.5 กิโลดาลตันโดยน้ำย่อยได้รับการพิจารณาโอกาสน้อยที่จะเป็นภูมิแพ้(Fu et al., 2002) และถ้าสารก่อภูมิแพ้โปรตีนที่จะมาถึงและส่งผ่านเยื่อบุลำไส้ที่จะล้วงเอาการตอบสนองเป็นภูมิแพ้ที่พวกเขาจะต้องสามารถที่จะต่อต้านในกระเพาะอาหารและการย่อยอาหารtryptic และสภาพกรดของระบบย่อยอาหาร Cry1Ab / Ac โปรตีนถูกย่อยสลายได้อย่างรวดเร็วโดยเอนไซม์ย่อยอาหารเป็นการประเมินโดยทั้งSDS- หน้าและดวงตะวัน ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็น แต่ไม่ได้พิสูจน์ว่าโปรตีนที่ไม่มีกิจกรรมที่เป็นภูมิแพ้ตั้งแต่ความสัมพันธ์ระหว่างความต้านทานต่อการproteolysis และกิจกรรมที่เป็นภูมิแพ้ไม่สมบูรณ์(Fu et al., 2002). โปรตีน recombinant ถูกนำมาใช้ในเอกสารนี้ในการประเมินความปลอดภัยของ Cry1Ab / โปรตีน Ac ผลที่ได้รับจากโครงสร้างความเท่าเทียมกันและการทำงานการวิเคราะห์อธิบายว่า recombinant โปรตีนที่ผลิตจากเชื้อ E. coli เป็นตัวแทนที่เหมาะสมสำหรับโปรตีนที่สกัดจากข้าวโดยตรงดัดแปลงพันธุกรรม ความร้อนศึกษาความคงตัวแสดงให้เห็นว่าการรับรู้เดียวกันของความร้อนที่ได้รับโปรตีนและพื้นเมืองโดยการต่อต้านCry1Ab / แอนติบอดี Ac ชี้ให้เห็นว่าการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างที่เกี่ยวข้องกับการสูญเสียสภาพธรรมชาติไม่ส่งผลกระทบต่อการเข้าถึงepitope ซึ่งหมายความว่า epitope ค้นหาที่คล้ายคลึงกันซึ่งแสดงให้เห็นความคล้ายคลึงกันกับ ที่รู้จักกันepitopes ภูมิแพ้มีน้ำหนักที่สำคัญของหลักฐานในด้านความปลอดภัยนี้การประเมิน ที่จะมีการประเมินความเป็นพิษโดยตรงของโปรตีนในนมการศึกษาเฉียบพลันในหนูที่ถูกนำมาใช้สำหรับการประเมินความปลอดภัยของCry1Ab / โปรตีน Ac ในการศึกษานี้เมาส์เฉียบพลันในช่องปากLD50 เป็น> 5000 mg กก. 1 (น้ำหนักตัว) ซึ่งเป็นของจริงชั้นประถมศึกษาปีที่ปลอดสารพิษ ผลลัพธ์ที่ได้จะมีความบังเอิญ Delaney et al, (2008) ซึ่งแสดงให้เห็นผลทางพิษวิทยาเมาส์เฉียบพลันการศึกษากับโปรตีนในพืชจีเอ็มคือCry1Ab> 4000 (ปาก) และ Cry1Ac> 4200 (ปาก) ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่า Cry1Ab / โปรตีน Ac มีอันตรายต่อสิ่งมีชีวิตของมนุษย์และสัตว์ไม่มี

Results (Thai) 3:

โปรตีนแอลเลอเจนหลายอื่นเพิ่มความเป็นไปได้
ที่ glycosyl กลุ่มร่วมของพวกเขา allergenicity
( เจนกินส์ et al . , 1996 ) นี้อาจเกี่ยวข้องเมื่อพิจารณา
allergenicity โปรตีนนวนิยายซึ่งอาจแตกต่างอย่างมากจากรูปแบบ
glycosylation counterparts ดั้งเดิมของพวกเขา ค้นหา
สำหรับเว็บไซต์ n-glycosylation ศักยภาพพบสี่เว็บไซต์ดังกล่าวบน
cry1ab / AC โปรตีนแต่ในหลอดทดลองหรือพิสูจน์ว่าไม่มี
n-glycosylation เว็บไซต์บน cry1ab / AC โปรตีนจริง .
ยกเว้นโปรตีนโปรตีนที่ทำให้เกิดการแพ้ละอองเกสรดอกไม้ทั้งหมด
มีความมั่นคงสูง เอนไซม์ที่ใช้ในการย่อยอาหาร ดังนั้นความมั่นคง
สามารถใช้เป็นตัวชี้วัดศักยภาพของโปรตีนที่เป็นสารก่อภูมิแพ้ ( Astwood
,1996 ) มันได้รับรายงานว่าโปรตีนไฮโดรไลซ์
อย่างรวดเร็วเพื่อเปปเดียวและกรดอะมิโนที่มีขนาดเล็กกว่า 3.5 กิโลดาลตันโดยเอนไซม์เปปซิน
ถือว่ามีโอกาสน้อยที่จะเป็นภูมิแพ้
( Fu et al . , 2002 ) และถ้าสารโปรตีนจะเข้าถึงและผ่านเยื่อบุลำไส้
ผ่านทางการตอบสนองภูมิแพ้พวกเขา
ต้องสามารถต้านทางอาหารและการย่อยอาหารและสภาวะกรด
ของระบบย่อยอาหาร การ cry1ab / AC ของโปรตีนเอนไซม์ย่อยสลาย
อย่างรวดเร็ว โดยเป็นทั้งหน้าและประเมินโดย SDS
และ Western blot ผลลัพธ์เหล่านี้ขอแนะนำ แต่ไม่ได้พิสูจน์
โปรตีนที่ไม่มีข้อมูลกิจกรรม เนื่องจากความสัมพันธ์ระหว่าง
ฤทธิ์ต้านทานและโปรตีโ ลซิสแพ้ไม่ได้เด็ดขาด
( Fu et al . , 2002 ) .
โปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่ใช้ในงานวิจัยนี้เพื่อประเมินความปลอดภัยของ cry1ab
AC / โปรตีน ผลที่ได้จากการทดสอบค่าการทำงานและโครงสร้าง

อธิบายว่ารีคอมบิแนนท์โปรตีนที่ผลิตจากเชื้อ E . coli เป็นเหมาะสมแทน
โปรตีนสกัดโดยตรงจากข้าวดัดแปลงพันธุกรรม การศึกษาเสถียรภาพความร้อน
แสดงการยอมรับกันของความร้อน